鵝副粘病毒NP蛋白ELISA抗體消長規(guī)律及其與HI抗體的相關(guān)性.pdf

1、鵝副粘病毒病又稱鵝源新城疫，是由鵝副粘病毒(Goose Paramyxovirus，GPMV)引起的一種急性、烈性傳染病。該病以鵝消化道和呼吸道病變?yōu)橹饕卣鳎哂懈叨鹊陌l(fā)病率和死亡率，給養(yǎng)鵝業(yè)帶來了嚴重的危害。由于目前我國對鵝副粘病毒病的危害性缺乏足夠重視，尚缺乏完善的疾病診斷、監(jiān)測技術(shù)。面對該病在我國有逐步擴大的趨勢，開展鵝副粘病毒病的診斷和檢測技術(shù)的研究迫在眉睫。在血清學(xué)的臨床檢測方面，目前已經(jīng)有多次關(guān)于雞新城疫ELISA與HI檢

2、測比較的報道，然而對于鵝副粘病毒病卻未見這方面的報導(dǎo)。本研究以NP蛋白為檢測抗原對鵝副粘病毒病進行了ELISA與HI檢測抗體相關(guān)性的比較。 GPMV屬于副粘病毒科，副粘病毒亞科，腮腺炎病毒屬，禽副粘病毒(Avian ParamyxovimsAPMV)Ⅰ型中的成員，具有基因Ⅶ型新城疫(NDV)的典型特征。NP蛋白是鵝副粘病毒核衣殼的主要結(jié)構(gòu)蛋白，在自然感染或者疫苗免疫后的動物中都可以產(chǎn)生針對NP蛋白的抗體，具有重要的診斷價值。本研

3、究通過原核表達載體pET-30a，成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒pET-30a-NP，并通過大腸桿菌表達系統(tǒng)原核表達GPMV-NP蛋白。以純化的NP蛋白為包被抗原建立了ELISA檢測方法，通過對各個反應(yīng)條件的優(yōu)化，最終確定了最佳反應(yīng)條件。 本實驗選取50只來源于肇東非疫區(qū)的鵝，隨機分為A、B、C、D 4組。A組為非免疫對照組；B組為免疫組；C組為免疫攻毒組；D組為人工感染組。分別在第一次免疫前、免疫后及攻毒后第1、2、3、4、5、6、7、8

4、、9、10、11、12、14、18周采血。對上述血清進行ELISA定量檢測及HI抗體的檢測。比較各組鵝群NP蛋白ELISA抗體和HI抗體的相關(guān)性，分別建立了相關(guān)的回歸方程。免疫組：ELISA=0.1981 HI+0.054.1(r=0.9134，P<0.05)；免疫攻毒組：ELISA=0.1807 HI-0.0744(r=0.8240，P<0.05)；人工感染組：ELISA=0.2728 HI-0.4498(r=0.8795，P<0.0