超聲聯(lián)合造影劑對大鼠肝卵圓細(xì)胞增殖模型的評價及對基因轉(zhuǎn)染的作用.pdf

1、[目的]
　　 運(yùn)用二維超聲及超聲造影定量評價大鼠部分肝切除后肝臟體積改變與血流灌注的變化，為大鼠肝卵圓細(xì)胞增殖模型的肝再生實(shí)時動態(tài)監(jiān)測提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 [方法]
　　 SD雄性大鼠50只，隨機(jī)分兩組，正常對照組6只，實(shí)驗(yàn)組44只。按改良的Solt-Farber模型構(gòu)建方法，灌喂2-乙酰氨基芴(2-acetylaminofluorene，2-AAF)后切除2/3肝臟。實(shí)驗(yàn)組切肝術(shù)后8h存活的36只小鼠分別在術(shù)

2、后第2、4、8、12、16、20天對肝右外側(cè)葉取材進(jìn)行病理切片、免疫組化檢查。術(shù)后預(yù)定時間點(diǎn)均應(yīng)用超聲及超聲造影動態(tài)觀察肝臟改變。測量切除肝、殘肝的質(zhì)量及大鼠體質(zhì)量，計(jì)算肝再生指數(shù)與肝再生率，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 [結(jié)果]
　　 1、實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟體積逐漸增大，各時間點(diǎn)超聲體積測值較手術(shù)當(dāng)天比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 2、大鼠切肝后第2天、第4天、第8天的時間一強(qiáng)度曲線(time-inten

3、sity curve，TIC)絕對峰值強(qiáng)度、上升斜率、曲線下面積與正常組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。第8天與第12天、第16天比較，在絕對峰值強(qiáng)度、始增時間、上升斜率、曲線下面積參數(shù)上均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；第16天的始增時間與正常對照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 3、切肝后第8天與第12天肝臟再生率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。肝臟再生指數(shù)第2天與其他時間點(diǎn)的比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0

4、.05)。第8天與第12天比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)
　　 4、直線回歸分析結(jié)果得出，超聲測得各時間點(diǎn)的肝臟體積變化與肝臟再生率、再生指數(shù)呈現(xiàn)較強(qiáng)的相關(guān)關(guān)系(R=0.859，P<0.000；R=0.857，P<0.000)。
　　 5、從Spearman's相關(guān)分析結(jié)果看，超聲造影各參數(shù)與肝再生率的相關(guān)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.000)，其中絕對峰值強(qiáng)度、上升斜率與肝再生率的相關(guān)系數(shù)分別為0.875和0.850

5、；超聲造影各參數(shù)與肝體積變化的相關(guān)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.000)，其中絕對峰值強(qiáng)度、上升斜率與肝體積變化的相關(guān)系數(shù)分別為0.669和0.786。
　　 6、病理及免疫組化結(jié)果：切肝后各個時間點(diǎn)肝組織匯管區(qū)及周圍均存在增生的卵圓細(xì)胞。
　　 [結(jié)論]
　　 成功建立了大鼠肝卵圓細(xì)胞增殖模型，并利用超聲聯(lián)合造影劑定期監(jiān)測實(shí)驗(yàn)組大鼠的肝體積變化、肝血流灌注狀況，將超聲檢測結(jié)果與肝再生指數(shù)、肝再生率進(jìn)行相關(guān)分析，驗(yàn)證

6、了超聲應(yīng)用于肝再生動態(tài)觀察的可行性。
　　 [目的]
　　 評價低頻超聲輻照造影劑SonoVue對綠色熒光蛋白(Green FluorescentProtein，EGFP)質(zhì)粒在大鼠肝卵圓細(xì)胞增殖模型肝臟中表達(dá)的作用，比較經(jīng)尾靜脈和門靜脈不同注射途徑，目的基因的轉(zhuǎn)染效率。
　　 [方法]
　　 造模成功雄性SD大鼠45只，隨機(jī)分為4組，每組9只：A組：EGFP；B組：EGFP+SonoVue；C組：EGF

7、P+超聲輻照；D組：EGFP+SonoVue+超聲輻照(尾靜脈注射)；E組：EGFP+SonoVue+超聲輻照(門靜脈注射)。每組又分為4個亞組，每組3只，分別在1、3、7天麻醉處死取材，制作肝組織冰凍切片后立即在熒光顯微鏡下觀察，采用Image Pro Plus軟件計(jì)算轉(zhuǎn)染效率。
　　 [結(jié)果]
　　 1、A組、B組、C組切片中均可見少量散在的綠色熒光表達(dá)，D組、E組均可見較多綠色熒光蛋白表達(dá)，熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，各組均在第