長循環(huán)阿柔比星A PELGE納米粒的研究.pdf

1、白血病(leukemia)是異常白細(xì)胞在骨髓和其他器官的廣泛浸潤，導(dǎo)致正常血細(xì)胞進(jìn)行性減少的惡性疾病。它是危害人類生命的十大惡性腫瘤之一，也是20歲以下青年死亡的主要病因之一。以傳統(tǒng)的方式靜注化療藥物會(huì)出現(xiàn)靜脈炎，會(huì)對(duì)肝臟造成損害等毒副反應(yīng)，限制了臨床上化療藥物的應(yīng)用。 根據(jù)三嵌段聚合物(PELGE)具有在血液中滯留時(shí)間長的特點(diǎn)，本課題以阿柔比星A(AclarubicinA，ACRB)為模型藥物，通過制備長循環(huán)阿柔比星APELG

2、E納米粒(ACRB-PELGE-NP)來使藥物在血液中的滯留時(shí)間延長、濃度升高，以達(dá)到增強(qiáng)藥物療效，降低藥物毒付作用的目的。 本課題系統(tǒng)的研究了可用于治療白血病的長循環(huán)阿柔比星APELGE納米粒(ACRB-PELGE-NP)和阿柔比星APLGA納米粒(ACRB-PLGA-NP)的制備、凍干工藝、初步穩(wěn)定性、體外釋放，以及體內(nèi)分布和藥代動(dòng)力學(xué)規(guī)律等內(nèi)容。 根據(jù)ACRB水不溶而在酸性溶液中溶解的特征，我們分別用復(fù)乳法和共沉淀

3、法制備了ACRB-PLGA-NP/ACRB-PELGE-NP，通過單因素試驗(yàn)考察了表面活性劑的種類和用量、ACRB的量、PLGA的量、水相體積等因素對(duì)ACRB-PLGA-NP性質(zhì)的影響，并比較了兩種方法制得的ACRB-PLGA-NP/ACRB-PELGE-NP的粒徑、包封率以及工藝重現(xiàn)性等指標(biāo)。共沉淀法制備的ACRB-PLGA-NP/ACRB-PELGE-NP粒徑較小(100-150nm)，包封率高(87％)，工藝簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好。因此，

4、在本試驗(yàn)中用共沉淀法制備ACRB-PLGA-NP/ACRB-PELGE-NP納米粒。并在此基礎(chǔ)上，以ACRB用量、PLGA用量和有機(jī)相與水相體積比為考察因素，以ACRB-PLGA-NP粒徑、包封率等為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用球面設(shè)計(jì)對(duì)處方和制備工藝進(jìn)行了優(yōu)化，為共沉淀法制備阿柔比星APELGE納米粒奠定了一定的基礎(chǔ)。優(yōu)化后得到的ACRB-PLGA-NP的粒徑為127.3nm，包封率為86.99％，載藥為8.70％。優(yōu)選的制備工藝簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，包

5、封率高，有利于藥物的有效利用。 參照優(yōu)化后的ACRB-PLGA-NP處方與工藝，我們制備了ACRB-PELGE-NP，并考察了PEG分子量，PEG百分含量對(duì)ACRB-PELGE-NP粒徑、Zeta電位、包封率和載藥量的影響。隨著PEG分子量和百分含量的增加，ACRB-PELGE-NP的粒徑、Zeta電位、包封率和載藥量變化趨勢(shì)不明顯。并在此基礎(chǔ)上制成了ACRB-PLGA-NP/ACRB-PELGE-NP凍干針劑，實(shí)驗(yàn)中我們對(duì)制得

6、的凍干針劑進(jìn)行了全面質(zhì)量評(píng)價(jià)，結(jié)果表明凍干過程不影響ACRB-PLGA-NP/ACRB-PELGE-NP的質(zhì)量，ACRB-PLGA-NP/ACRB-PELGE-NP的粒徑及分布、包封率、載藥量、pH等有關(guān)質(zhì)量指標(biāo)均無明顯改變。吸濕性試驗(yàn)結(jié)果表明，ACRB-PLGA-NP/ACRB-PELGE-NP凍干針劑的臨界相對(duì)濕度為73.92％-75.40％，四種納米粒凍干針劑的臨界相對(duì)濕度無明顯差別。初步穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果顯示ACRB-PLGA-NP

7、/ACRB-PELGE-NP凍干針劑穩(wěn)定性良好。 體外釋藥結(jié)果表明，四種納米粒的體外釋藥曲線都包括突釋和緩釋兩部分，釋藥曲線由Weibull方程與一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程相結(jié)合的雙相動(dòng)力學(xué)方程模型擬合較好。隨著PEG分子量和百分含量的改變，四種納米粒之間的釋藥速度相差不大。 選用小鼠為動(dòng)物模型，以ACRB-PLGA-NP凍干針劑為對(duì)照，研究了ACRB-PELGE(B2)-NP凍干針劑在體內(nèi)的分布和藥代動(dòng)力學(xué)規(guī)律。結(jié)果表明，與ACR

8、B-PLGA-NP凍干針劑相比，在肝臟中，ACRB-PELGE-NP凍干針劑給藥后各時(shí)間點(diǎn)濃度和藥物百分比均顯著低于同等劑量的ACRB-PLGA-NP凍干針劑給藥后同一時(shí)間點(diǎn)肝臟中的藥物濃度和藥物百分比：靜注ACRB-PELGE-NP凍干針劑后，0.5h，4h，24h和72h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)肝臟中的藥物濃度分別為分別為30.24ug/ml、18.57ug/ml、9.43ug/ml和4.63ug/ml；靜注ACRB-PLGA-NP凍干針劑后，相

9、應(yīng)以上時(shí)間點(diǎn)四個(gè)時(shí)間點(diǎn)肝臟中的藥物濃度分別為40.23ug/ml、32.62ug/ml、15.34ug/ml和8.51ug/ml，分別降低了0.25、0.43、0.39和0.46倍，肝臟中藥物百分比分別從70.49％、76.96％、72.95％和76.21％降低到63.21％、62.79％、57.16％和51.22％。在血液中，ACRB-PELGE-NP凍干針劑給藥后各時(shí)間點(diǎn)濃度和藥物百分比均高于同等劑量的ACRB-PLGA-NP凍干針

10、劑給藥后同一時(shí)間點(diǎn)血液中的藥物濃度和藥物百分比：靜注ACRB-PELGE-NP凍干針劑后，0.5h，4h，24h和72h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)血液中的藥物濃度分別為6.10ug/ml、3.21ug/ml、1.91ug/ml和1.15ug/ml；靜注ACRB-PLGA-NP凍干針劑后，相應(yīng)以上時(shí)間點(diǎn)四個(gè)時(shí)間點(diǎn)血液中的藥物濃度分別為4.67ug/ml、1.82ug/ml、1.02ug/ml和0ug/ml，分別提高了0.31倍、0.76倍、0.87倍。血

11、液中藥物百分比分別從10.91％、5.27％、6.47％、0提高到17.00％、14.47％、14.79％和16.96％，顯示了ACRB-PELGE-NP在血液中的滯留時(shí)間延長。與ACRB-PLGA-NP凍干針劑相比，在心臟、脾、腎臟中，ACRB-PELGE-NP凍干針劑給藥后各時(shí)間點(diǎn)藥物濃度和藥物百分比變化不明顯。ACRB-PELGE-NP凍干針劑在血液中的半衰期(61.80h)明顯大于ACRB-PLGA-NP凍干針劑在血液中的半衰期

12、(23.94h)。引入了藥物靶向指數(shù)(DrugTargetingIndex，DTI)和藥物選擇性指數(shù)(DrugSelectingIndex，DSI)對(duì)ACRB-PELGE-NP凍干針劑對(duì)肝臟、血液、脾、肺、腎和心臟的靶向性進(jìn)行定量評(píng)價(jià)，結(jié)果表明相比于ACRB-PLGA-NP，ACRB-PELGE-NP凍干針劑較ACRB-PLGA-NP對(duì)肝臟靶向性明顯降低，而對(duì)血液靶向性明顯升高。ACRB-PELGE-NP在心、脾、肺、腎中的靶向性分布差