Hedgehog信號通路對人胃癌SGC-7901細胞體外血管形成的調控.pdf

1、目的：胃癌在我國的發(fā)病率呈持續(xù)上升趨勢，嚴重影響人類健康。目前研究證實，Hedgehog(Hh)信號通路可通過調控細胞周期，粘附侵襲，血管形成，凋亡等細胞事件參與多種腫瘤的的發(fā)生進展，膠質瘤相關癌基因1(Glioma-associated oncogene homolog，Gli1)作為該通路的效應因子，成為評價該通路活化程度的關鍵因子。血小板源性生長因子-D（Platelet-derived growth factor D，PDGF-

2、D）作為強烈的促腫瘤血管形成因子，已被證實在多種腫瘤中異常高表達。但是Hh信號通路是否可以通過調控PDGF-D的表達來影響腫瘤血管形成尚不明確。本研究擬通過使用Hh信號通路特異阻斷劑環(huán)巴明(Cyclopamine)處理胃癌SGC-7901細胞，觀察處理前后Gli1和PDGF-D的mRNA和蛋白水平的變化及癌細胞體外形成血管管腔樣結構的能力，來探討Hedgehog信號通路調控腫瘤血管形成的可能機制。
　　方法：常規(guī)培養(yǎng)人胃癌SGC-

3、7901細胞和人臍靜脈內皮細胞(Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)，將SGC-7901細胞分為對照組A（未給藥）、實驗組B（環(huán)靶明終濃度5μmol/L）及實驗組C（環(huán)靶明終濃度10μmol/L），培養(yǎng)48h后，免疫熒光檢測各組Gli1和PDGF-D在SGC-7901細胞中的表達;通過小管形成試驗和血管擬態(tài)試驗檢測細胞處理前后血管形成能力的變化;RT-PCR和Western-Blot檢

4、測細胞處理前后Gli1、PDGF-D的mRNA和蛋白表達變化，并對二者mRNA和蛋白表達水平進行相關性分析。
　　結果：Gli1和PDGF-D在各組SGC-7901細胞中均有表達;實驗組SGC-7901細胞的體外血管形成能力較對照組下降，且呈劑量依賴性，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);實驗組Gli1和PDGF-D的mRNA和蛋白表達較對照組均受到顯著抑制，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，且二者mRNA和蛋白表達水平呈正相關