帶半乳糖配體的psiRNA基因載體研究和多功能聚合物囊泡載體的研究.pdf

1、近年來，納米高分子聚合物微粒作為一種優(yōu)良的載體，已廣泛用于基因、藥物及造影劑的傳遞。本論文主要研究了帶半乳糖配體的psiRNA基因載體和多功能聚合物囊泡載體兩方面內(nèi)容。 陽離子聚合物聚乙烯亞胺(PEI)作為一種新型的非病毒基因載體，在肝臟疾病的基因治療中有廣泛的應(yīng)用前景。由于哺乳動(dòng)物的肝細(xì)胞表面含有去唾液酸糖蛋白(ASGP)受體，能專一性的識(shí)別和結(jié)合半乳糖殘基，為提高PEI運(yùn)載psiRNA對(duì)肝細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，本文合成了半乳糖偶聯(lián)

2、聚乙二醇接枝支化聚乙烯亞胺(Gal—PEG—hy—PEI)和聚乙二醇接枝支化聚乙烯亞胺(PEG—hy—PEI)兩種共聚物，并對(duì)其psiRNA復(fù)合物的基本理化性質(zhì)(如粒徑、Zeta電位、穩(wěn)定性、細(xì)胞毒性等)和對(duì)psiRNA在肝細(xì)胞的體外轉(zhuǎn)染進(jìn)行了研究。研究表明，隨著Gal—PEG—hy—PEI與psiRNA的N/P增高，復(fù)合物的粒徑隨之減小而Zeta電位升高。復(fù)合物Gal—PEG—PEI/psiRNA對(duì)肝細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效果依賴于N/P，在N/

3、P為8時(shí)達(dá)到最高的轉(zhuǎn)染效率37.34％，遠(yuǎn)大于復(fù)合物PEG/psiRNA或lipofectamine2000/psiRNA。在含有游離半乳糖的環(huán)境中，復(fù)合物Gal—PEG—PEI/psiRNA對(duì)肝細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率從37.34％降到3.60％，Gal—PEG—hy—PEI載體表現(xiàn)出良好的肝細(xì)胞靶向性，且其細(xì)胞毒性較小，因而在肝臟疾病的基因治療方面有較好的應(yīng)用前景。 針對(duì)干細(xì)胞的MRI活體示蹤和聚合物納米囊泡的研究背景，本論文制備了以

4、聚合物聚乙二醇—聚丙交酯(PEG—PDLLA)為基材，裝載核磁共振顯像劑Gd—DTPA的聚合物囊泡，并研究了其基本的理化性質(zhì)(粒徑、形貌、Gd—DTPA的包覆率、MRI顯像效果)。通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)了，Gd—DTPA能被裝載于聚合物囊泡的親水性內(nèi)腔里，裝載Gd—DTPA的聚合物囊泡粒徑為100～200nm，并表現(xiàn)出很好的MRI成像效果，用聚合物囊泡裝載Gd—DTPA用作MRI成像對(duì)比劑具有可行性。本文還嘗試對(duì)烯丙基—聚乙二醇—聚丙交酯(All