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文檔簡介
1、目的:
通過觀察活血通督湯對家兔脊髓缺血再灌注損傷后肢運動功能及細胞凋亡因子c-fos、c-jun表達的影響,探討該方的作用機制。
方法:
1、后肢運動功能的作用觀察:24只新西蘭家兔,雌雄不限,體重2000±200g,按照隨機數(shù)字法分為假手術(shù)組,缺血再灌注組,活血通督湯組,每組8只。假手術(shù)組:生理鹽水灌胃,b.i.d,術(shù)前1周,術(shù)后3周;缺血再灌注組:生理鹽水灌胃,b.i.d,術(shù)前1周,術(shù)后3周;活血通督
2、湯組:活血通督湯灌胃,b.i.d,術(shù)前1周,術(shù)后3周。假手術(shù)組僅分離L3-6,缺血再灌注組及活血通督湯組分離并夾閉L3-6,30min后松開動脈夾恢復血流制成脊髓缺血再灌注損傷模型。觀察再灌注8h、24h、1w、2w、3w共五個時間點的后肢運動功能并采用Jacobs法對家兔后肢運動功能評分。
2、機制探討:96只新西蘭家兔,雌雄不限,體重2000±200g,按照隨機數(shù)字法分為假手術(shù)組、缺血再灌注組、活血通督湯組,每組32只。每
3、組中再分為再灌注0.5h、1h、4h、8h四個亞組,每個亞組8只家兔。假手術(shù)組:生理鹽水灌胃,b.i.d,術(shù)前1周;缺血再灌注組:生理鹽水灌胃,b.i.d,術(shù)前1周;活血通督湯組:活血通督湯灌胃,b.i.d,術(shù)前1周。假手術(shù)組僅分離L3-6,缺血再灌注組及活血通督湯組分離并夾閉L3-6,30min后松開動脈夾恢復血流制成脊髓缺血再灌注損傷模型。三組分別于造模成功后再灌注0.5h、1h、4h、8h共四個時間點取家兔的脊髓,采用Wester
4、n-blot法檢測脊髓組織中c-fos、c-jun蛋白的含量,并用免疫組化法檢測脊髓組織c-fos、c-jun陽性細胞的表達量。
結(jié)果:
1、在脊髓缺血再灌注8h、24h、1w、2w、3w共五個時間點,假手術(shù)組的后肢運動功能均正常,與術(shù)前無明顯變化;缺血再灌注組及活血通督湯組Jacobs評分均低于假手術(shù)組,與假手術(shù)組比較差異顯著(P<0.01)。缺血再灌注組及活血通督湯組脊髓缺血再灌注8h,Jacobs評分均下降,其
5、中缺血再灌注組下降明顯,兩組比較差異統(tǒng)計學意義顯著(P<0.01);脊髓缺血再灌注8h-24h,缺血再灌注組及活血通督湯組后肢運動功能恢復緩慢,脊髓缺血再灌注24h,兩組比較有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.01)。隨著脊髓缺血再灌注時間的延長,在24h-3w,缺血再灌注組后肢運動功能恢復不明顯,活血通督湯組后肢運動功能恢復明顯,與缺血再灌注組在1w、2w、3w三個時間段Jacobs評分比較有顯著性差異(P<0.01)。
2、c-fo
6、s和c-jun蛋白在假手術(shù)組0.5h、1h、4h、8h四個時間點都有輕度表達;在缺血再灌注組和活血通督湯組中0.5h表達上升,到1h時均達到最高峰,之后開始持續(xù)降低。在相同的時間點,缺血再灌注組及活血通督湯組中c-fos和c-jun的表達量均高于假手術(shù)組,且有顯著性差異(P<0.01);活血通督湯組中四個時間點c-fos和c-jun的表達量均低于缺血再灌注組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。
結(jié)論:
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