臟器間質樹突狀細胞在多器官功能障礙綜合征中的變化與作用研究.pdf

1、目的：觀察小鼠肺臟、肝臟與腎臟間質樹突狀細胞的形態(tài)、數(shù)量和分布，了解MODS小鼠肺臟、肝臟與腎臟間質樹突狀細胞病變以及DC功能相關的細胞因子、趨化因子及炎癥因子在MODS病程中的變化規(guī)律與意義，探討間質DC在免疫紊亂、過度炎癥及臟器損傷機制中的影響與作用，為MODS免疫學機制與防治研究提供新的依據(jù)。 方法：腹腔注射酵母多糖復制C57BL/6小鼠MODS模型，分為正常對照、3-6小時、12-48小時、5-7日和10-12日組。光鏡

2、與電鏡觀察MODS各期小鼠肺臟、肝臟和腎臟組織病理學改變，臟器間質樹突狀細胞的形態(tài)、數(shù)量和分布特點及變化規(guī)律。運用免疫學方法檢測間質樹突狀細胞表面標記物CD11c和CD205、共刺激分子CD80、CD86和MHC-Ⅱ類分子的表達水平及肺臟中IL-1β、IL-10及CGRP的表達情況。運用RT-PCR法檢測趨化因子SLC及其受體CCR7在肺臟中的表達變化情況，判定MODS各期肺間質樹突狀細胞的遷移活性。流式細胞術檢測MODS各期外周血CD

3、4+T細胞與CD8+T細胞的數(shù)量與比值，外周血單個核細胞對MHC-Ⅱ分子表達的變化。 結果：間質樹突狀細胞廣泛分布于正常小鼠肺臟、肝臟與腎臟中，數(shù)量極少，約占各臟器總細胞數(shù)的5-9‰，大部分處于非成熟狀態(tài)，低表達CD80、CD86與MHC-Ⅱ分子。致傷早期(3-6小時)，各臟器功能與病理改變輕微。間質DC顯著增生，對CD80、CD86和MHC-Ⅱ分子的表達輕度增加。外周血中MHC-Ⅱ陽性的單個核細胞與CD4+T細胞數(shù)均減少，CD

4、4/8比值下降。趨化因子SLC及其受體CCR7在肺組織中表達水平均較正常組輕度上升。炎癥因子IL-1β、IL-10和CGRP在肺組織中陽性細胞數(shù)較正常組顯著升高；急性損傷期(12-48小時)，各臟器出現(xiàn)功能改變，臟器實質細胞損傷較重。間質DC繼續(xù)保持增生狀態(tài)，數(shù)量略低于致傷早期，但CD80、CD86和MHC-Ⅱ分子陽性細胞數(shù)顯著上升。外周血MHC-Ⅱ陽性的單個核細胞及CD4+T細胞數(shù)顯著減少，CD4/8比值明顯下降。SLC與CCR7在肺

5、組織中表達明顯高于正常組。促炎因子IL-1β在肺內表達繼續(xù)增多，達到高峰；緩解期(5-7日)，臟器功能與病理變化明顯減輕。間質DC數(shù)量仍高于正常組，但其功能與活性降低并趨于正常水平。外周血MHC-Ⅱ陽性的單個核細胞與CD4+T細胞數(shù)均有增加，CD4/8比值回升。肺組織中SLC繼續(xù)保持上升趨勢，而CCR7則開始下降。肺臟炎癥因子IL-1β表達顯著減少，趨于正常；MODS期(10-12日)，各臟器病理改變嚴重，功能處于衰竭狀態(tài)。間質DC再一

6、次高度增生，但其對CD80、CD86和MHC-Ⅱ表達顯著下降。外周血MHC-Ⅱ陽性的單個核細胞數(shù)下降至最低點，CD4+T細胞也明顯減少，CD4/8比值顯著下降。肺組織中SLC表達水平繼續(xù)上升，而CCR7表達水平明顯下降，低于正常組。肺內IL-1β陽性細胞數(shù)仍處于較低水平，IL-10和CGRP表達顯著升高，達到峰值。 結論：1.觀察并描述了小鼠肺臟、肝臟和腎臟間質樹突狀細胞的含量、分布及形態(tài)特征。2.臟器間質樹突狀細胞在小鼠MOD

7、S模型各時期中數(shù)量及活性的變化與臟器功能和結構的病理變化存在著密切關系，臟器間質樹突狀細胞的變化可能影響或參與了MODS病程中的免疫失衡與免疫抑制過程。3.趨化因子SLC及其受體CCR7可能是影響MODS小鼠肺臟間質樹突狀細胞免疫功能的一個重要因素。CCR7表達水平可以作為估價間質樹突狀細胞遷移活性和機體免疫應答水平的一個指標。4.肺間質樹突狀細胞的活性和數(shù)量的變化與促炎因子和抗炎因子表達的變化在MODS病程中具有密切的相關性和規(guī)律性，