膽總管梗阻致急性膽囊炎及膽總管梗阻解除后對(duì)腫瘤壞死因子-α及膽囊組織中巨噬細(xì)胞的研究.pdf

1、目的：膽總管梗阻可以引起急性膽囊炎，因此，如何進(jìn)一步認(rèn)識(shí)膽總管梗阻是引起急性膽囊炎的一種原因，探索其防治措施為患者減輕痛苦、避免患者遭受不必要的膽囊切除手術(shù)是本試驗(yàn)的重要目的。本研究采用家兔膽總管結(jié)扎致膽總管梗阻動(dòng)物模型，觀察膽總管梗阻不同時(shí)間及梗阻解除后的家兔體溫(temperature)、白細(xì)胞(white bloodcell)、膽囊組織內(nèi)巨噬細(xì)胞(maerophage)的數(shù)量，以及血清及組織中的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)數(shù)值的

2、變化，探討膽總管梗阻引起急性膽囊炎的作用機(jī)理，為其治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：選擇健康家兔72只，體重2kg-3kg，雌雄不限，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(N組)，膽總管梗阻1天組(D1組)、3天組(D3組)、5天組(D5組)、7天組(D7組)、膽總管梗阻1天后解除組(R1組)、膽總管梗阻3天后解除組(R3組)、膽總管梗阻5天后解除組(R5組)、膽總管梗阻7天后解除組(R7組)、每組8只，解除梗阻組均解除3天后處死。所有家兔手術(shù)前一天禁食

3、，不禁水。手術(shù)時(shí)，家兔以3％戊巴比妥鈉麻醉，無菌操作，上腹正中切口，剖腹后觀察腹腔大體情況，游離膽總管下段，經(jīng)膽總管后置一外徑2mm的細(xì)硅膠管(導(dǎo)管內(nèi)穿引一10號(hào)絲線)，置入管及穿引線經(jīng)皮下隧道由腹壁戳孔穿出，引出處位于兩側(cè)肋緣下，距切口2cm，提起硅膠管和絲線，其緊張度以能阻止膽流為度，固定懸吊的膠管，關(guān)腹。正常對(duì)照組僅開腹游離膽總管，不置入硅膠管，梗阻解除組將置入管由腹壁抽出解除梗阻。術(shù)后禁食，自由飲水。造模后放置于代謝籠中，梗阻組

4、分別于造模1天、3天、5天、7天后處死，解除組均于膽總管解除3天后處死，處死前測(cè)量家兔體溫。各組均留取靜脈血標(biāo)本，檢測(cè)白細(xì)胞數(shù)值，放射免疫法檢測(cè)血清中腫瘤壞死因子-α的數(shù)值，摘取膽囊，并取膽囊底部(保證各組所取標(biāo)本部位一致)，稱重200m g，研磨成勻漿，離心后取上清液于-20℃保存，用于放射免疫法測(cè)量腫瘤壞死因子-α。取其余適量膽囊組織置于10％甲醛中固定，制作石蠟切片，采用免疫組織化學(xué)方法測(cè)量膽囊組織中的巨噬細(xì)胞的數(shù)量，所有數(shù)據(jù)結(jié)果

5、均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組間均數(shù)比較采用因素方差分析，p<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 白細(xì)胞：家兔血液中白細(xì)胞數(shù)值隨梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸升高，造模組與正常組有差異(p<0.05)，梗阻解除組與梗阻組比較有差異(p<0.05)，R1與D1比較白細(xì)胞數(shù)值下降，有差異(p<0.05)；R3與D3比較白細(xì)胞數(shù)值下降有差異(p<0.05)；R5與D5比較白細(xì)胞數(shù)值下降有差異(p<0.05)；R7與D7比較白細(xì)胞數(shù)值下降有差異

6、(p<0.05)。 體溫：家兔體溫隨梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸升高，造模組與正常組差異(p<0.05)，梗阻解除組與梗阻組比較有差異(p<0.05)，R1與D1比較體溫下降有差異(p<0.05)；R3與D3比較體溫下降有差異(p<0.05)；R5與D5比較體溫下降有差異(p<0.05)；R7與D7比較白細(xì)胞數(shù)值下降有差異(p<0.05)。 TNF-α：家兔梗阻組血清中和膽囊組織中腫瘤壞死因子-α也隨著梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸增多。各組與正常組

7、差異(p<0.05)，梗阻組組間有差異(p<0.05)，梗阻解除組與梗阻組比較有差異(p<0.05)，R1與D1比較減少有差異(p<0.05)，R3與D3比較減少有差異(p<0.05)，R5與D5比較減少有差異(p<0.05)，R7與D7比較減少有差異(p<0.05)。 巨噬細(xì)胞：家兔膽總管梗阻組膽囊內(nèi)巨噬細(xì)胞的數(shù)量的表達(dá)隨梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)也增多，各組與正常組比較增多，有差異(p<0.05)，梗阻組組間有差異(p<0.05)，

8、R1與D1比較減少有差異(p<0.05)，R3與D3比較減少有差異(p<0.05)，R5與D5比較減少有差異(p<0.05)。R7與D7比較減少有差異(p<0.05)。 結(jié)論：1膽總管梗阻能引起家兔的體溫升高，白細(xì)胞的升高及膽囊組織巨噬細(xì)胞的增多及血清和膽囊組織腫瘤壞死因子.僅的升高，引起急性膽囊炎，并隨梗阻時(shí)間的延長(zhǎng)，膽囊炎癥越重。2膽總管梗阻的解除對(duì)可以降低膽總管梗阻家兔的體溫，降低膽囊組織的巨噬細(xì)胞及血清和膽囊組織腫瘤壞死