速激肽人hemokinin-1片段(4-11)對白血病細(xì)胞增殖與分化作用的研究及其NK-,1-受體細(xì)胞表達(dá)模型的建立與應(yīng)用.pdf

1、人hemokinin-1及其羧基端片段(4-11)是由近來在人類中鑒定的TAC4基因所編碼的哺乳動物速激肽。研究表明速激肽在人體內(nèi)具有免疫調(diào)節(jié)功能，且人hemokinin-1能夠顯著抑制人類急性髓系白血病細(xì)胞HL-60的增殖。因此我們研究了人hemokinin-1片段(4-11)對該細(xì)胞增殖與分化的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)人hemokinin-1片段(4-11)(1-300μM)能夠抑制HL-60細(xì)胞的增殖，并且是劑量依賴的，同時(shí)這種抑制作用是伴

2、隨著將細(xì)胞周期阻滯于S期。我們還發(fā)現(xiàn)HL-60細(xì)胞的NBT還原能力在人hemokinin-1片段(4-11)作用下能夠顯著增強(qiáng)，表明此片段具有誘導(dǎo)該細(xì)胞分化的作用。但是速激肽NK1受體拮抗劑SR140333和速激肽NK2受體拮抗劑SR48968卻不能拮抗人hemokinin-1片段(4-11)的作用。所有的結(jié)果顯示：人hemokinin-1片段(4-11)不僅能抑制HL-60細(xì)胞的增殖，也能誘導(dǎo)其分化，但是卻不是通過經(jīng)典的速激肽受體發(fā)揮

3、作用的。我們的研究暗示人hemokinin-1片段(4-11)或許可以作為一種免疫調(diào)節(jié)因子來參與癌癥治療。
　　 速激肽SP通過NK1受體在一些生理過程包括痛覺傳遞和炎癥中扮演了重要的角色。NK1受體是G蛋白偶聯(lián)受體家族的一員，最近的研究表明SP通過與NK1受體結(jié)合，可以激活多種細(xì)胞內(nèi)的應(yīng)答，包括cAMP的生成、絲裂活化原蛋白激酶(MAPK)的級聯(lián)反應(yīng)。人hemokinin-1及其片段(4-11)同屬于速激肽家族成員，但并沒有文

4、獻(xiàn)報(bào)道兩者對于細(xì)胞內(nèi)信號的影響。因此，我們將NK1受體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染中國倉鼠卵母細(xì)胞(CHO)，并從DNA、RNA及蛋白水平篩選得到穩(wěn)定表達(dá)NK1受體的細(xì)胞克隆。利用此模型，我們檢測了人hemokinin-1及其片段(4-11)對細(xì)胞內(nèi)cAMP水平和ERK1/2磷酸化的影響。結(jié)果表明兩者均可以明顯增加細(xì)胞內(nèi)的cAMP積累，并在一定程度上誘導(dǎo)ERK1/2的磷酸化。本部分只是對速激肽受配體結(jié)合對細(xì)胞信號通路的影響進(jìn)行了初步的研究，為以后新型速激肽