白血病細(xì)胞ADRM1的表達(dá)及其作用研究.pdf

1、目的：研究ADRM1在白血病細(xì)胞中的表達(dá)及其作用。
　　方法：⑴實(shí)時(shí)定量 RT-PCR（qRT-PCR）及 Western Blot方法分析白血病細(xì)胞中ADRM1 mRNA與蛋白表達(dá)水平；⑵利用短發(fā)卡 RNA（shRNA）下調(diào) HL60白血病細(xì)胞ADRM1表達(dá)；qRT-PCR及 Western Blot分析 ADRM1 shRNA的沉默效果；⑶應(yīng)用姬姆薩染色、生長曲線法、細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞周期與凋亡

2、檢測(cè)、Western Blot觀察NF-κBp65核轉(zhuǎn)位等方法研究ADRM1下調(diào)后HL60生物學(xué)行為變化與分子機(jī)制。
　　結(jié)果：①ADRM1 mRNA在急性白血病細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)（n=116）；ADRM1 mRNA表達(dá)水平與白血病幼稚細(xì)胞比率成正相關(guān)，P<0.05；ADRM1蛋白在急性白血病細(xì)胞中普遍上調(diào)（n=16）；②利用shRNA干擾成功下調(diào)HL60細(xì)胞ADRM1表達(dá)；③姬姆薩染色顯示 ADRM1下調(diào)后HL60細(xì)胞形態(tài)未見顯著差

3、異；后續(xù)功能實(shí)驗(yàn)表明 ADRM1下調(diào)顯著抑制HL60細(xì)胞增殖（抑制率為48.82±12.58％）和集落形成，使細(xì)胞停滯在G0/G1期并誘發(fā)細(xì)胞凋亡，但對(duì)細(xì)胞遷移、侵襲能力則無顯著影響；Western Blot檢測(cè)顯示ADRM1下調(diào)不影響NF-κBp65總蛋白和漿蛋白表達(dá)，但顯著抑制其在核內(nèi)表達(dá)。這說明 ADRM1促進(jìn)HL60細(xì)胞 NF-κB p65蛋白核轉(zhuǎn)位。
　　結(jié)論：ADRM1在白血病細(xì)胞中高表達(dá)，ADRM1下調(diào)可能通過抑制N