白血病細胞ADRM1的表達及其作用研究.pdf

1、目的：研究ADRM1在白血病細胞中的表達及其作用。
　　方法：⑴實時定量 RT-PCR（qRT-PCR）及 Western Blot方法分析白血病細胞中ADRM1 mRNA與蛋白表達水平；⑵利用短發(fā)卡 RNA（shRNA）下調 HL60白血病細胞ADRM1表達；qRT-PCR及 Western Blot分析 ADRM1 shRNA的沉默效果；⑶應用姬姆薩染色、生長曲線法、細胞集落形成實驗、Transwell實驗、流式細胞周期與凋亡

2、檢測、Western Blot觀察NF-κBp65核轉位等方法研究ADRM1下調后HL60生物學行為變化與分子機制。
　　結果：①ADRM1 mRNA在急性白血病細胞中表達上調（n=116）；ADRM1 mRNA表達水平與白血病幼稚細胞比率成正相關，P<0.05；ADRM1蛋白在急性白血病細胞中普遍上調（n=16）；②利用shRNA干擾成功下調HL60細胞ADRM1表達；③姬姆薩染色顯示 ADRM1下調后HL60細胞形態(tài)未見顯著差

3、異；后續(xù)功能實驗表明 ADRM1下調顯著抑制HL60細胞增殖（抑制率為48.82±12.58％）和集落形成，使細胞停滯在G0/G1期并誘發(fā)細胞凋亡，但對細胞遷移、侵襲能力則無顯著影響；Western Blot檢測顯示ADRM1下調不影響NF-κBp65總蛋白和漿蛋白表達，但顯著抑制其在核內(nèi)表達。這說明 ADRM1促進HL60細胞 NF-κB p65蛋白核轉位。
　　結論：ADRM1在白血病細胞中高表達，ADRM1下調可能通過抑制N