PIRH2高表達(dá)與肝細(xì)胞癌差的預(yù)后相關(guān).pdf

1、研究背景：肝細(xì)胞癌(Hepatocellular Carcinoma，HCC)是世界上最常見的惡性腫瘤之一，全球肝癌每年新發(fā)病例數(shù)62.6萬人，死亡59.8萬人，其中半數(shù)以上發(fā)生在我國(guó)。肝癌因其高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率及高死亡率，已成為威脅我國(guó)和世界人民生命健康的重要兇手。 因此，研究HCC發(fā)生發(fā)展的機(jī)制，尋找新的HCC預(yù)后標(biāo)志物和潛在的HCC藥物干預(yù)靶點(diǎn)，有著重要意義。泛素-蛋白酶體通路(Ubiqutin-Proteasome

2、pathway)是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種蛋白質(zhì)代謝途徑，其介導(dǎo)了多種蛋白質(zhì)的降解，并在細(xì)胞周期調(diào)控，DNA損傷修復(fù)及細(xì)胞凋亡等方面發(fā)揮了重要作用。其中以泛素連接酶E3在該通路中發(fā)揮了最關(guān)鍵的作用。近年來大量研究顯示，泛素連接酶E3在多種惡性腫瘤中過表達(dá)，并參與了腫瘤的發(fā)生發(fā)展，且與多種腫瘤的不良預(yù)后密切相關(guān)，目前泛素連接酶E3已經(jīng)成為腫瘤藥物治療的靶點(diǎn)和不良預(yù)后的標(biāo)志物。PIRH2是最近發(fā)現(xiàn)的泛素連接酶E3家族的新成員，目前研究發(fā)現(xiàn)，PIR

3、H2在肺癌、前列腺癌等腫瘤中表達(dá)上調(diào)，并能抑制凋亡，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，發(fā)揮癌基因功能。鑒于泛素連接酶E3的重要作用、PIRH2的生物學(xué)功能及在腫瘤中的過表達(dá)，我們推測(cè)PIRH2與HCC的發(fā)生、發(fā)展可能相關(guān)。而目前尚未見有關(guān)PIRH2在HCC組織中的表達(dá)情況及功能研究。因此，本實(shí)驗(yàn)中我們首次檢測(cè)了HCC組織中PIRFH2 mRNA和蛋白的表達(dá)水平，并分析了PIRH2表達(dá)水平與HCC臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系。 研究目的：研究P

4、IRH2在肝細(xì)胞癌組織中mRNA與蛋白表達(dá)水平，探討其與肝細(xì)胞癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，進(jìn)一步明確肝癌發(fā)生發(fā)展的機(jī)制和尋找潛在的肝癌藥物治療靶點(diǎn)和不良預(yù)后的標(biāo)志物。 研究方法：采用半定量逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(RT-PCR)和Western blot檢測(cè)30例新鮮肝癌組織、癌旁組織(PCLT)以及5例正常肝組織(NL)中PIRH2 mRNA和蛋白表達(dá)水平，采用免疫組化的方法檢測(cè)78例肝癌石蠟切片標(biāo)本中PIRH2蛋白表達(dá)水平

5、及亞細(xì)胞定位。比較PIRH2 mRNA與蛋白表達(dá)水平在肝癌組織、癌旁肝組織及正常肝組織中的差異，并探討其與肝癌臨床病理特征之間的關(guān)系。結(jié)合臨床隨訪分析PIRH2蛋白表達(dá)水平與肝細(xì)胞癌患者預(yù)后的關(guān)系。 結(jié)果：RT-PCR和Western blot結(jié)果均顯示30例新鮮肝癌組織中PIRH2 mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯高于癌旁肝組織(0.62±0.23 vs0.46±0.29，P=0.020:0.88±0.30 VS 0.66±0.2

6、6，P=0.004)和正常肝組織(0.62±0.23 VS 0.38±0.11，P=0.029；0.88±0.30 VS 0.45±0.21，P=0.005)，而PIRH2mRNA和蛋白表達(dá)水平在癌旁肝組織和正常肝組織中的表達(dá)差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。Edmondson-Steiner分級(jí)III-IV級(jí)的肝癌中PIRH2 mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯高于Edmondson-Steiner分級(jí)I-II級(jí)的肝癌(0.70±0.18

7、 VS 0.48±0.24，P=0.010:0.91±0.23 VS 0.64±0.17，P=0.003)，在有靜脈浸潤(rùn)的肝癌明顯高于無靜脈浸潤(rùn)的肝癌(0.67+0.21 VS 0.42±0.17，P=0.012；0.87±0.24 VS 0.62±0.14，P=0.021)，而與患者性別、年齡、肝硬化程度、有無包膜形成、結(jié)節(jié)數(shù)及腫瘤的直徑大小等臨床病理特征無關(guān)(P>0.05)。免疫組化結(jié)果顯示PIRH2蛋白表達(dá)主要定位于胞漿。在78例

8、肝癌石蠟切片標(biāo)本中，HCC組織的PIRH2蛋白陽性表達(dá)率明顯高于癌旁組織(85.9％VS 26.8％，P<0.001)。PIRH2蛋白表達(dá)強(qiáng)度在Edmondson-Steiner分級(jí)III-IV級(jí)及有靜脈浸潤(rùn)的肝癌明顯高于Edmondson-Steiner分級(jí)I-II級(jí)及無靜脈浸潤(rùn)的肝癌(P=0.019；P=0.012)，而與患者性別、年齡、肝硬化程度、有無包膜形成、結(jié)節(jié)數(shù)及腫瘤的直徑大小等臨床病理特征無關(guān)(P>0.05)。PIRH2蛋

9、白表達(dá)強(qiáng)度與肝癌預(yù)后呈明顯負(fù)相關(guān)，PIRH2高表達(dá)組HCC患者術(shù)后總生存時(shí)間及無瘤生存時(shí)間均明顯短于低表達(dá)組(中位生存時(shí)間275天vs 378天，P=0.0002；中位生存時(shí)間200天vs 310天，P=0.0005)。多因素Cox回歸分析顯示PIRH2蛋白表達(dá)水平是HCC預(yù)后的獨(dú)立影響因素。 結(jié)論：PIRH2 mRNA和蛋白水平在肝癌組織中表達(dá)上調(diào)，并與肝癌的Edmondson-Steiner分級(jí)及有無靜脈浸潤(rùn)相關(guān)。PIRH2