胃癌SGC7901細(xì)胞特異性結(jié)合肽的篩選及鑒定.pdf

1、目的:利用體內(nèi)噬菌體展示技術(shù),篩選與人胃癌細(xì)胞株SGC7901特異性親和的短肽,以利于指導(dǎo)臨床胃癌的早期診斷和靶向性治療,提高胃癌治療的針對性。
　　方法:建立裸鼠胃癌模型,將噬菌體通過尾靜脈注射入裸鼠體內(nèi),經(jīng)過四輪篩選,得到富集的噬菌體,即與短肽結(jié)合的目標(biāo)噬菌體,回收腫瘤組織以及對照的心臟、肝臟和腦組織中的噬菌體并測定效價(jià),同時(shí)利用免疫組化及 ELISA等試驗(yàn)方法對目標(biāo)噬菌體進(jìn)行檢測,提取噬菌體DNA,進(jìn)行序列測定,得到特異性短

2、肽序列。
　　結(jié)果:成功構(gòu)建裸鼠胃癌模型;經(jīng)過四輪的篩選,免疫組化結(jié)果顯示:腫瘤組織結(jié)合的噬菌體得到明顯富集,心臟及腦組織結(jié)合的噬菌體沒有富集。通過回收噬菌體效價(jià)的測定,腫瘤組織結(jié)合噬菌體為肝臟組織的88.8倍,腦組織的6.7×104倍,心臟組織9.7×104倍。ELISA結(jié)果顯示P/N>2.1的陽性克隆有19個(gè), P/N>2.5以上的克隆有13個(gè),其中P/N>3.0的克隆有3個(gè),一般來說當(dāng)P/N(OD克隆/OD隨機(jī)對照克隆)>2