D型沙眼衣原體質(zhì)粒蛋白pgp3的克隆、表達、鑒定及其免疫原性初探.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩62頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、[目的]獲得D型沙眼衣原體質(zhì)粒蛋白pgp3基因及其蛋白，制備鼠源性多克隆抗體，鑒定蛋白免疫原性。
　　[方法]聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增目的基因，將其插入pZeroBack載體，對pZeroBack/pgp3和原核表達載體pGEX-6p-1進行酶切后連接，產(chǎn)物轉(zhuǎn)化入大腸埃希菌DH5α，提取質(zhì)粒進行酶切、測序、PCR鑒定。再將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入大腸埃希菌BL21并經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達，Western印跡鑒定目的蛋白，GST磁珠(GST M

2、agBeads)純化pgp3-谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶融合蛋白（pgp3-GST融合蛋白）。用純化后的蛋白免疫Balb/c小鼠，制備多克隆抗體，Western印跡、細(xì)胞免疫熒光鑒定抗體的特異性，間接ELISA法測定抗體滴度。
　　[結(jié)果]克隆目的基因測序長度為795bp，序列與GeneBank中一致，Western印跡顯示目的蛋白分子量約為54000，并得到純化的蛋白。獲得鼠源性多克隆抗體，經(jīng)Western印跡和細(xì)胞免疫熒光鑒定抗體可特

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論