降鈣素和1,25維生素D拮抗牙周炎大鼠牙槽骨喪失的療效觀察.pdf

1、目的:本實驗通過建立大鼠牙周炎模型并對其應用1，25維生素D及降鈣素后，觀察牙周探診深度(probing depth，PD)、牙槽骨喪失水平，檢測血清中的骨堿性磷酸酶(bone alkaline phosphatase，BALP)及骨鈣素(osteocalcin，OC)的濃度的變化情況。以探討降鈣素與1，25維生素D對牙周炎導致大鼠牙槽骨喪失的影響，從而為牙周炎的輔助治療探索一種新的可行方法。
　　方法:清潔級健康成年雄性Wist

2、ar大鼠125只，隨機分為A、B、C、D、E5組(n=25只/組)，即A組為空白對照組，B組為牙周炎對照組，C組為降鈣素治療組，D組為1，25維生素D治療組，E組為降鈣素和1，25維生素D聯合治療組。B、C、D、E組用正畸結扎絲結扎雙側上頜第一磨牙牙頸部加高糖軟食的方法建立牙周炎大鼠模型。A組麻醉后不作處理。用正畸結扎絲結扎上頜磨牙牙頸部加高糖軟食的方法建立牙周炎大鼠模型后，給予藥物治療，降鈣素治療組(C組，降鈣素溶于生理鹽水，2μg/

3、kg，皮下注射)、1，25維生素D治療組（D組，維生素D溶于花生油中，2μg/kg，灌胃）、降鈣素和1，25維生素D聯合治療組（E組）。觀察各組大鼠的一般指標:體質量變化，活動情況，毛色等。在第2周、4周、6周和8周末各組處死5只大鼠，測量雙側上頜第一磨牙牙周探診深度，觀察牙槽骨喪失水平;第8周末各組采取10只大鼠腹部降主動脈血，用酶聯免疫吸附試驗法(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)檢測血

4、清中的骨堿性磷酸酶（Bone alkaline phosphatase，BALP）以及骨鈣素(Osteocalcin，OC)的濃度。留取大鼠上頜骨，經10％甲醛固定后，15％的EDTA脫鈣，常規(guī)石蠟包埋切片HE染色觀察牙周組織的病理變化，包括牙周膜纖維排列和炎細胞浸潤程度以及牙槽骨情況。應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包分析實驗數據，符合正態(tài)分布和方差齊性計量資料采用均數±標準差(x±s)表示。多組資料間均數比較采用單因素方差分析，組間多重

5、比較采用LSD-t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果:A組大鼠活潑好動，形體均勻，反應敏捷，每日飲量少且尿量少，毛色光滑，體質量隨著周齡的增長而穩(wěn)步的增長。B、C、D、E組大鼠于結扎術3天后，表現為食欲下降，唾液量增多，生長基本良好，每日飲量少且尿量少，隨后食欲逐漸如常，體質量隨著周齡的增長而穩(wěn)步的增長。通過對A組和B組大鼠雙側上頜第一磨牙PD的比較可以發(fā)現，用藥2周，B組大鼠的PD高于A組大鼠(P＜0.05)。B組

6、與C、D、E組PD差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;用藥后4周、6周和8周，B組PD均高于C、D、E組(P＜0.05)，且E組PD低于C組和D組。通過對A組和B組大鼠雙側上頜第一磨牙牙槽骨喪失水平的比較可以發(fā)現，用藥2周，B組大鼠牙槽骨喪失水平高于A組(P＜0.05)。B組大鼠與C、D、E組大鼠牙槽骨喪失水平差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;用藥4周時，B組與C、D、E組牙槽骨喪失水平差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）;用藥6周和8周時，

7、B組牙槽骨喪失水平高于C、D、E組（P＜0.05），且E組低于C組和D組;在第8周末進行血清中BALP及OC的檢測。8周時，A組BALP、OC均高于B組(P＜0.05);且B、C、D、E組間BALP和OC的水平差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。8wk時組織病理學觀察發(fā)現差異，HE染色顯示A組牙齦上皮完整，結合上皮位于釉牙骨質界，牙槽嵴頂無吸收。B組牙周袋形成，牙齦乳頭喪失，牙齦上皮表面糜爛，牙周膜纖維排列紊亂炎癥細胞浸潤牙槽骨吸收嚴重