2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過培養(yǎng)小鼠3T3-L1細胞,誘導分化為成熟脂肪細胞,用高糖高胰島素誘導建立脂肪細胞胰島素抵抗模型,觀察不同濃度可溶性環(huán)氧化物水解酶抑制劑t-AUCB對胰島素抵抗脂肪細胞的葡萄糖攝取率、TNF-α、和脂聯(lián)素分泌、及GLUT-4mRNA表達和蛋白合成的影響。
  方法:
  1、小鼠3T3-L1細胞的誘導和分化;
  2、脂肪細胞胰島素抵抗模型的建立:采用高糖高胰島素培養(yǎng)基誘導培養(yǎng)脂肪細胞,并通過檢測培養(yǎng)后脂肪細胞

2、對葡萄糖的攝取率鑒定模型是否成功;
  3、將建立模型后的脂肪細胞共分為5組(每組含脂肪細胞約2×104個細胞),其中1組為對照組,其余4組為干預組,分別采用不同濃度(0,1,10,50,100μmol/L)t-AUCB干預培養(yǎng)24 h,同時,取普通培養(yǎng)的脂肪細胞作為空白對照組。分別提取上清液,收集脂肪細胞;
  4、采用葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法測定各組上清液中葡萄糖的濃度,計算葡萄糖攝取率;
  5、采用ELISA

3、法檢測各組上清液脂聯(lián)素、TNF-α水平;
  6、采用Real time-PCR法檢測各組脂肪細胞GLUT4mRNA表達,采用免疫印跡法檢測各組脂肪細胞GLUT4蛋白水平。
  結果:
  1.3T3-L1前脂肪細胞誘導分化為成熟脂肪細胞,經(jīng)油紅O染色后,光鏡下可見分化成熟的脂肪細胞內(nèi)的脂滴被染成橘紅色。
  2.高糖高胰島素培養(yǎng)液誘導后的脂肪細胞葡萄糖攝取率與普通培養(yǎng)液培養(yǎng)的脂肪細胞葡萄糖攝取率相比有顯著差異(

4、3±1.9%VS40±1.2%,P<0.05)。
  3.采用1,10,50,100μmol/L的t-AUCB干預后,脂肪細胞對葡萄糖攝取率分別為7±1.5%、17±1.2%、32±1.6%、36±0.9%,均明顯高于對照組(3±1.4%),差異具有顯著性意義(均P<0.05),且呈濃度依賴性增高(均P<0.05)??瞻讓φ战M葡萄糖攝取率顯著高于對照組(42±1.7% VS3±1.4%,P<0.05)。
  4.采用1,10

5、,50,100μmol/L的t-AUCB干預后,脂肪細胞上清液脂聯(lián)素濃度水平分別為,0.64±0.07、1.30±0.11、1.66±0.05、2.33±0.04 ng/mL,均明顯高于對照組(0.33±0.02 ng/mL),差異具有顯著性意義(均P<0.05),且呈濃度依賴性增高(均 P<0.05)??瞻讓φ战M脂聯(lián)素濃度水平顯著高于對照組(3.04±0.07 VS0.33±0.02ng/mL,P<0.05)。
  5.采用1,

6、10,50,100μmol/L的t-AUCB干預后,脂肪細胞上清液TNF-a濃度水平分別為,163.30±3.24、125.52±2.08、93.93±2.62、49.65±1.20pg/mL,均明顯低于對照組(182.34±4.89 pg/mL),差異具有顯著性意義(均 P<0.05),且呈濃度依賴性降低(均P<0.05)??瞻讓φ战MTNF-a濃度水平顯著低于對照組(8.06±1.80 VS182.34±4.89pg/mL,P<0.0

7、5)
  6.采用1,10,50,100μmol/L的t-AUCB干預后,脂肪細胞GLUT-4mRNA表達 RQ值分別為1.28±0.41、2.00±0.08、2.42±0.12、3.41±0.21,均明顯高于對照組(1.12±0.18),差異具有顯著性意義(均P<0.05),且呈濃度依賴性增高(均P<0.05)??瞻讓φ战MGLUT-4mRNA表達RQ值顯著高于對照組(3.67±0.26 VS1.12±0.18,P<0.05)。<

8、br>  7.采用1,10,50,100μmol/L的t-AUCB干預后,脂肪細胞GLUT-4蛋白的光密度值(GLUT-4/GAPDH)分別為0.329±0.118、0.472±0.123、0.623±0.172、0.756±0.112,均明顯高于對照組(0.312±0.115),差異具有顯著性意義(均 P<0.05),且呈濃度依賴性增高(均 P<0.05)??瞻讓φ战M脂肪細胞 GLUT-4蛋白的光密度值(GLUT-4/GAPDH)顯著

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