芪參還五膠囊對大鼠失神經(jīng)骨骼肌運動終板作用的透射電鏡觀察的實驗研究.pdf

1、目的:從透射電鏡的角度觀察中藥芪參還五膠囊對大鼠失神經(jīng)支配后的骨骼肌運動終板變性的影響。
　　 方法:實驗分組情況為:選取雄性成年Sprague-Dawley大鼠40只，按隨機數(shù)字表法平均分為實驗組與對照組各20只:實驗組灌服中藥芪參還五膠囊生理鹽水溶液，3.0g生藥/ml，1ml/100g體重，每日一次;對照組生理鹽水灌胃組，生理鹽水1ml/100g體重，每日一次。分別設(shè)立造模后1天、3天、1周、2周、4周末亞組。各亞組于造模

2、后當日灌胃，至取材當日為止。造模:無菌操作下，于臀肌間隙分離進入，暴露梨狀肌及其下的坐骨神經(jīng)后，于梨狀肌下緣0.8cm處切除約1cm坐骨神經(jīng)，遠近端翻轉(zhuǎn)180°，分別進行固定，阻止神經(jīng)間的自然生長。電鏡切片的制作:選左下肢為實驗側(cè)，腹部皮膚2％碘伏液消毒后，10％水合氯醛腹腔注射麻醉。造模后1天、3天、1周、2周、4周末亞組大鼠分別于左下肢后側(cè)縱切口切取腓腸肌中上段神經(jīng)入肌點處肌組織約9mm3，經(jīng)4％戊二醛固定、脫水、樹脂包埋、半包定位

3、、甲苯胺藍染色、超薄切片、鈾-鉛雙重電子染色。
　　 結(jié)果:造模1天亞組大鼠行走困難，左側(cè)肢體跛行，透射電鏡切片見終板突觸后區(qū)域正常，突觸后膜皺褶明顯，分級清晰易辨，突觸間隙正常，軸突內(nèi)線粒體發(fā)生腫脹，突觸小泡開始聚集，軸突終末脫離突觸后膜，初級間隙寬度增加并且變得不均勻，治療組與對照組大鼠活動及電鏡顯示無差別;造模3天亞組大鼠行走跛行狀況緩解，左側(cè)行走無力。透射電鏡切片見終板突觸后區(qū)域變寬，初級皺褶和次級皺褶變淺，突觸間隙變寬

4、，軸突內(nèi)線粒體進一步腫脹，實驗組與對照組無明顯差別;造模1周亞組實驗組大鼠行走跛行無力，肌萎縮。電鏡下見運動終板萎縮，初級皺褶和次級皺褶未繼續(xù)變淺，線粒體無空泡變性;對照組大鼠行走狀況同實驗組，處置側(cè)肌萎縮重于實驗組。電鏡下見運動終板萎縮，初級皺褶和次級皺褶扭曲導(dǎo)致次級突觸間隙變寬，線粒體空泡變性;造模2周亞組實驗組大鼠仍可見行走跛行無力。電鏡顯示運動終板萎縮，初級皺褶和次級皺褶扭曲導(dǎo)致次級突觸間隙變寬，線粒體空泡變性，對照組大鼠行走狀

5、況同實驗組，處置側(cè)肌萎縮重于實驗組。電鏡下可見運動終板突觸后區(qū)域簡單化，次級皺褶局部消失，突觸間隙繼續(xù)增寬;造模4周亞組實驗組大鼠跛行仍存在。電鏡顯示運動終板突觸后區(qū)域簡單化，次級皺褶局消失，突觸間隙略繼續(xù)增寬，對照組大鼠行走跛行及肌萎縮狀況同實驗組。電鏡觀察運動終板結(jié)構(gòu)嚴重破壞，以至不能辯認，剩余運動終板初級皺褶扁平，次級皺褶消失。
　　 結(jié)論:造模1天、3天末時，芪參還五膠囊對大鼠失神經(jīng)支配后的運動終板無明顯保護和預(yù)防變性的