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1、目的:觀察熱應(yīng)激預(yù)處理對(duì)腦缺血昆明小鼠海馬神經(jīng)元的保護(hù)作用并初步探討其可能機(jī)制.方法:采用Morris水迷宮篩選空間學(xué)習(xí)記憶能力正常的昆明小鼠96只(40±5g),雌雄不限.將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為4組:正常對(duì)照組(Normal)、熱應(yīng)激預(yù)處理后缺血再灌注組(HS/IR)、缺血再灌注組(IR)和單純熱應(yīng)激組(HS);處理后分別存活3小時(shí)、1天、4天、14天,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只,處死前重復(fù)水迷宮檢測(cè).常規(guī)尼氏染色法計(jì)數(shù)海馬CA1區(qū)存活神經(jīng)元數(shù)目,免疫組
2、織化學(xué)方法結(jié)合圖像分析技術(shù)檢測(cè)微管相關(guān)蛋白-2、環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白、降鈣素基因相關(guān)肽表達(dá)的變化.結(jié)果:水迷宮檢測(cè)發(fā)現(xiàn)IR組小鼠逃避潛伏期增加(P<0.01),其搜索策略以邊緣式和限制式為主,而其它三組搜索策略以趨向式和直線式為主.尼氏染色顯示IR組和HS/IR組錐體細(xì)胞減少,且IR組細(xì)胞丟失的比HS/IR組更多(P<0.05);MAP-2免疫組化顯示4天時(shí)海馬CA1區(qū)輻射層的樹(shù)突發(fā)生紊亂和斷裂,MAP-2有明顯減少(P<0.05
3、),14天時(shí)IR組MAP-2陽(yáng)性表達(dá)主要聚集于胞漿中.CREB免疫組化顯示24小時(shí)HS/IR組和IR組的海馬CA1區(qū)CREB有明顯增多(P<0.01),且HS/IR組CREB比IR組增高的更多(P<0.05).CGRP免疫組化顯示4天時(shí)HS組、HS/IR組和IR組的海馬CA1區(qū)CGRP有明顯增高,且HS/IR組CGRP比IR組增高的更多(P<0.05).結(jié)論:熱應(yīng)激預(yù)處理可以改善動(dòng)物腦缺血處理后引起的學(xué)習(xí)記憶功能,對(duì)海馬神經(jīng)元起保護(hù)作用
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