海參腸肽對糖基化終末產(chǎn)物誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷的作用及其機制的研究.pdf

1、目的：探討海參腸肽提取物對糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）所致的人臍靜脈內(nèi)皮細胞氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)及凋亡等損傷是否具有保護作用及其機制。
　　方法：人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVECs）分別給予10μ M（終濃度下同）氨基胍/維生素E及不同濃度海參腸肽（10,20,40ug/ml）干預(yù)，半小時后暴露于終濃度為200μ g/ml AGEs中培養(yǎng)48小時，分別對細胞進行AO/EB染色并在共聚焦顯微鏡下觀察；MDA、SOD、ROS試劑盒檢測；RIP

2、A強裂解液裂解細胞提取細胞蛋白，通過蛋白凝膠成像檢測RAGE,、NF-kB及TGF-β1等蛋白的表達情況。
　　結(jié)果：（1）不同濃度海參腸肽提取物可抑制AGEs所致的臍靜脈內(nèi)皮損傷，差異具有統(tǒng)計學意義，經(jīng)10、20、40ug/ml海參腸肽干預(yù)的細胞凋亡率分別為24.95±0.66％，17.13±0.62%,12.20±0.71%（均P＜0.01）；（2）與對照組相比，不同濃度海參腸肽可顯著降低ROS、MDA含量，提高SOD活性（均

3、P＜0.01），10、20、40ug/ml海參腸肽干預(yù)的細胞ROS活性分別為117.18±1.52%,109.25±4.89%，105.60±3.97%，MDA含量分別為2.56±0.08nmol/ml,1.89±1.45nmol/ml及1.71±0.84nmol/ml，SOD活性分別為80.45±18.56U/ml,96.82±9.32U/ml,102.23±9.32U/ml；（3）不同濃度海參腸肽提取物干預(yù)人臍靜脈內(nèi)皮細胞后，RAG

4、E、NF-kB及TGF-β1等蛋白表達量與對照組比較均顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義（均P＜0.01），10、20、40ug/ml海參腸肽干預(yù)細胞后RAGE相對表達量分別為1.15±0.03,0.89±0.04,0.78±0.03(對照組濃度為1，下同）,NF-kB相對表達量分別為0.55±0.04,0.45±0.02,0.37±0.02，TGF-β1相對表達量分別為0.75±0.03,0.72±0.08,0.66±0.03。