糖基化終產物對人臍靜脈內皮細胞eNOS活性和表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究糖基化終產物(AGEs)對內皮型一氧化氮合酶(eNOS)的活性及其蛋白表達的影響.方法:用糖孵育法制備糖基化修飾的牛血清白蛋白(AGE-BSA),用膠原酶法分離培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞(HUVECs).將內皮細胞與不同濃度的AGE-BSA在體外共同孵育不同時間,用同位素二步色譜法檢測基礎狀態(tài)下以及組胺刺激后的eNOS活性,用蛋白免疫印跡法(Western-blotting)檢測eNOS蛋白表達水平.結果:(1)基礎狀態(tài)下,HUVE

2、Cs的eNOS有部分激活,組胺刺激后的eNOS活性顯著增加.(2)AGE-BSA顯著抑制基礎狀態(tài)下的eNOS活性和組胺刺激后的eNOS活性增高,這種抑制作用呈時間、濃度依賴性.(3)AGE-BSA與HUVECs共同孵育24小時后的eNOS表達水平顯著降低(P<0.001),且隨著孵育時間的延長,eNOS表達水平進一步降低(P<0.05,48h vs 24h),這種抑制作用與AGE-BSA的濃度有關.結論:AGE-BSA顯著抑制eNOS基

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