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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究熊果酸(Ursolic Acid,UA)對(duì)ox-LDL誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化損傷的保護(hù)作用,并進(jìn)一步探討該作用是否通過(guò)Keap1-Nrf2-ARE信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)。
方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞待細(xì)胞生長(zhǎng)密度為80%時(shí),進(jìn)行分組處理,分成六組:對(duì)照組不加任何處理;ox-LDL組,加入ox-LDL培養(yǎng)24h,終濃度為20mg/
2、L; ox-LDL+低濃度熊果酸組,加入熊果酸(濃度1.5μmlo/L)及ox-LDL(濃度20mg/L)共同培養(yǎng)24h;ox-LDL+中濃度熊果酸組,加入熊果酸(濃度3.0μmlo/L)及ox-LDL(濃度20mg/L)共同培養(yǎng)24h; ox-LDL+高濃度熊果酸組,加入熊果酸(濃度6.0μmlo/L)及ox-LDL(濃度20mg/L)共同培養(yǎng)24h; ox-LDL+維生素E組(對(duì)照藥物組),加入維生素E(濃度200mg/L)及ox-
3、LDL(濃度20mg/L)共同培養(yǎng)24h。待細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后,采用MTT試驗(yàn)方法測(cè)定細(xì)胞吸光值,進(jìn)而計(jì)算細(xì)胞生存率;采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)及Western blot分別在mRNA和蛋白水平檢測(cè)Keap1、Nrf2、HO-1的表達(dá)情況。
結(jié)果:對(duì)照組、ox-LDL組、ox-LDL+低濃度熊果酸組、ox-LDL+中濃度熊果酸組、ox-LDL+高濃度熊果酸組、對(duì)照藥物組各組兩兩比較,細(xì)胞吸光值、細(xì)胞生存率、HO-1
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