豬TGH基因組織表達(dá)差異研究及其生物信息學(xué)初步分析.pdf

1、動(dòng)物體內(nèi)的脂類代謝在機(jī)體的能量平衡上有重要作用。而脂肪組織中分解甘油三酯的過程尤為重要，因?yàn)橹窘M織是機(jī)體內(nèi)最大的能量儲(chǔ)存組織，能量的平衡很大程度上取決于甘油三酯的合成和分解代謝。甘油三酯的分解主要是在各種水解酶的作用下進(jìn)行的。激素敏感脂酶(Hormone sensitive lipase，HSL)是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)和克隆的脂肪細(xì)胞內(nèi)甘油三酯分解酶，曾被認(rèn)為是脂肪細(xì)胞中甘油三酯分解的限速酶。但隨著HSL基因敲除鼠的研究，殘留的40％基礎(chǔ)脂解

2、作用說明存在著另外的脂肪細(xì)胞脂解酶參與脂解作用。甘油三酯水解酶(Triacylglycerol hadrolase，TGH)是2004年所發(fā)現(xiàn)的具有脂解活性的酶，對(duì)TGH的研究主要集中在嚙齒類動(dòng)物，有關(guān)哺乳動(dòng)物中TGH的脂解作用研究尚未見報(bào)道。 本試驗(yàn)以豬為研究對(duì)象，利用半定量RT-PCR、Western-Blot技術(shù)研究甘油三酯水解酶在豬各組織中的表達(dá)規(guī)律，并且利用用生物信息學(xué)分析手段探討TGH的作用途徑，為進(jìn)一步研究TGH的

3、生物學(xué)功能奠定基礎(chǔ)。所取得的結(jié)果如下： 1.克隆了豬TGH基因部分序列，GenBank的登陸號(hào)為EF525540。與GenBank已發(fā)表的人、大鼠和小鼠的TGH基因進(jìn)行比對(duì)，同源性分別為95％、85％和86％，這說明豬部分TGH基因與人和鼠在核苷酸水平有較高的同源性。 2.在轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平，TGH的表達(dá)量存在著差異。在7種組織(肺臟、肝臟、脾臟、腎臟、心臟、皮下脂肪組織和內(nèi)臟脂肪組織)中都檢測(cè)到TGH mRNA表達(dá)，

4、其中皮下脂肪、大網(wǎng)膜脂肪和肝臟的表達(dá)量與其他組織相比差異顯著(P<0.5)。在蛋白水平上，除心臟和腎臟沒有檢測(cè)到表達(dá)外，其他組織均檢測(cè)到TGH表達(dá)，其中在脂肪、肝臟表達(dá)量較高，其次是肺臟和脾臟。這表明TGH的表達(dá)存在著轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)，這種調(diào)節(jié)作用主要與其所具有的功能相一致。 3.不同豬種間皮下脂肪TGH差異分析表明：在轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平，肥胖豬皮下脂肪TGH的表達(dá)顯著低于瘦肉型豬，與人類及嚙齒類動(dòng)物肥胖個(gè)體中TGH表達(dá)量下降的結(jié)論相