豬TGH基因組織表達差異研究及其生物信息學初步分析.pdf

1、動物體內(nèi)的脂類代謝在機體的能量平衡上有重要作用。而脂肪組織中分解甘油三酯的過程尤為重要，因為脂肪組織是機體內(nèi)最大的能量儲存組織，能量的平衡很大程度上取決于甘油三酯的合成和分解代謝。甘油三酯的分解主要是在各種水解酶的作用下進行的。激素敏感脂酶(Hormone sensitive lipase，HSL)是第一個被發(fā)現(xiàn)和克隆的脂肪細胞內(nèi)甘油三酯分解酶，曾被認為是脂肪細胞中甘油三酯分解的限速酶。但隨著HSL基因敲除鼠的研究，殘留的40％基礎脂解

2、作用說明存在著另外的脂肪細胞脂解酶參與脂解作用。甘油三酯水解酶(Triacylglycerol hadrolase，TGH)是2004年所發(fā)現(xiàn)的具有脂解活性的酶，對TGH的研究主要集中在嚙齒類動物，有關哺乳動物中TGH的脂解作用研究尚未見報道。 本試驗以豬為研究對象，利用半定量RT-PCR、Western-Blot技術研究甘油三酯水解酶在豬各組織中的表達規(guī)律，并且利用用生物信息學分析手段探討TGH的作用途徑，為進一步研究TGH的

3、生物學功能奠定基礎。所取得的結果如下： 1.克隆了豬TGH基因部分序列，GenBank的登陸號為EF525540。與GenBank已發(fā)表的人、大鼠和小鼠的TGH基因進行比對，同源性分別為95％、85％和86％，這說明豬部分TGH基因與人和鼠在核苷酸水平有較高的同源性。 2.在轉錄水平和翻譯水平，TGH的表達量存在著差異。在7種組織(肺臟、肝臟、脾臟、腎臟、心臟、皮下脂肪組織和內(nèi)臟脂肪組織)中都檢測到TGH mRNA表達，

4、其中皮下脂肪、大網(wǎng)膜脂肪和肝臟的表達量與其他組織相比差異顯著(P<0.5)。在蛋白水平上，除心臟和腎臟沒有檢測到表達外，其他組織均檢測到TGH表達，其中在脂肪、肝臟表達量較高，其次是肺臟和脾臟。這表明TGH的表達存在著轉錄后調(diào)節(jié)，這種調(diào)節(jié)作用主要與其所具有的功能相一致。 3.不同豬種間皮下脂肪TGH差異分析表明：在轉錄水平和翻譯水平，肥胖豬皮下脂肪TGH的表達顯著低于瘦肉型豬，與人類及嚙齒類動物肥胖個體中TGH表達量下降的結論相