小薊多糖的提純、硫酸酯化及抗氧化活性研究.pdf

1、小薊是近年來(lái)新興的一種食藥兼用的野菜,因其富含多種活性成分,因而引起全世界的極大關(guān)注。由于小薊具有多種生物活性,具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值和前景,因而對(duì)其活性成分的提取分離就顯得尤為重要?；钚远嗵欠植紡V泛,主要來(lái)源于植物、動(dòng)物、微生物等。多年來(lái)的藥理研究表明多糖作為免疫調(diào)節(jié)劑,在抗腫瘤、抗病毒,抗感染、抗氧化、降血糖血脂等各個(gè)方面均有廣泛的作用,而且安全低毒性,是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)與食品領(lǐng)域關(guān)注的研究熱點(diǎn)之一。然而,目前對(duì)于小薊多糖的研究卻鮮有報(bào)道。本文

2、以藥食兩用的傳統(tǒng)中藥材小薊為實(shí)驗(yàn)材料,對(duì)小薊多糖的提取、分離、純化、硫酸酯化改性及抗氧化活性進(jìn)行了研究。主要的結(jié)論如下:
　　1.采用索氏回流法對(duì)小薊粉末進(jìn)行脫脂,利用熱水-超聲輔助法進(jìn)行粗多糖的提取,并通過(guò)蒽酮-濃硫酸法測(cè)定其含量,結(jié)果:脫脂率為7.925％,小薊多糖的含量為6.43％。并以脫蛋白率及多糖損失率為指標(biāo),分別考察了Sevag法與TCA法對(duì)小薊葉片多糖的脫除蛋白效果,結(jié)果表明:Sevag法與 TCA法脫除蛋白率分別為

3、70.52％、73.01％,多糖損失率分別為16.29％、29.74％,Sevag法為小薊葉片多糖脫除蛋白的優(yōu)選方法。利用55％、75％、95％的乙醇分別對(duì)小薊粗多糖進(jìn)行沉淀,獲得了三種級(jí)分的多糖(CSPS-Ⅰ、CSPS-Ⅱ、CSPS-Ⅲ),多糖得率分別為5.75％、7.01％、8.67％。
　　2.以靜態(tài)吸附法和動(dòng)態(tài)吸附法分別考察了D101、D4020、AB-8、X-5四種大孔吸附樹(shù)脂對(duì)小薊多糖吸附和解析的純化效果,結(jié)果顯示:四

4、種樹(shù)脂對(duì)小薊多糖的純化效果以AB-8樹(shù)脂純化為最優(yōu),且動(dòng)態(tài)吸附法的吸附率與解析率明顯優(yōu)于靜態(tài)吸附法。在以上篩選實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了AB-8樹(shù)脂動(dòng)態(tài)吸附純化小薊多糖工藝條件,最佳條件為:上樣液濃度為2mg/mL,上樣量為20mL,流速為2.0mL/min,洗脫劑pH值為7。
　　3.采用濃硫酸法分別對(duì)CSPS-Ⅰp、CSPS-Ⅱp、CSPS-Ⅲp進(jìn)行了硫酸酯化的修飾,得酯化產(chǎn)物為CSPS-Ⅰps、CSPS-Ⅱ

5、ps、CSPS-Ⅲps,取代度分別為0.47、0.43、0.54。并且將酯化后多糖與粗多糖和純多糖進(jìn)行了清除·OH、O2-、NO2-的體外抗氧化的對(duì)比研究,結(jié)果表明小薊多糖具有一定的清除自由基的能力,對(duì)于不同的自由基,效果不盡相同,且呈一定的量效關(guān)系。一方面,硫酸酯化多糖對(duì)·OH和NO2-的清除率較粗多糖、純多糖有明顯提高,其次為純多糖,粗多糖的清除率最低。而硫酸酯化多糖對(duì)O2-的清除率較粗多糖、純多糖并沒(méi)有明顯的提高,相比較下,純多糖