應(yīng)用ECMO聯(lián)合超濾復(fù)蘇嚴重失血性休克兔減輕腎臟損傷的研究.pdf

1、研究背景和目的:嚴重的失血性休克是創(chuàng)傷后死亡的主要原因，對嚴重失血性休克的救治一直是外科發(fā)展的難題。習(xí)慣上，在早期進行液體復(fù)蘇可以快速恢復(fù)血壓和組織灌注，但是早期大量快速補液可以稀釋血液中的凝血因子，降低血液粘稠度，使血凝塊移位而增加出血及血栓栓塞的發(fā)生，并且對急性腎功能不全的治療效果一直不理想。體外膜肺氧合(extracorporeal membrane oxygenation，ECMO)因其強大的心肺替代功能，使許多危重癥的搶救成功

2、率明顯上升。特別是心肺功能嚴重受損的患者，應(yīng)用ECMO可以使心肺得到充分的休息，為后續(xù)的治療爭取時間。聯(lián)合超濾技術(shù)可以很好的濃縮血液，排除血液中的氧自由基、炎癥介質(zhì)和多余的水分，提高血漿膠體滲透壓，減輕組織間隙水腫，恢復(fù)體液平衡，減少因血流動力學(xué)的波動引起的并發(fā)癥。本實驗用新西蘭大白兔建立壓力控制型嚴重失血性休克的模型，分別利用ECMO聯(lián)合超濾和液體對實驗兔休克模型進行復(fù)蘇，對比復(fù)蘇效果，并觀察和探討ECMO聯(lián)合超濾技術(shù)在減輕試驗兔腎臟

3、損傷中的作用。
　　研究方法:
　　(1)選用新西蘭大白兔作為實驗動物，建立壓力控制型失血性休克的模型，觀察和對比不同復(fù)蘇方案的復(fù)蘇效果。新西蘭大白兔24只(n=24)，按不同的復(fù)蘇方案分為三組:1）休克未復(fù)蘇組，8只(n1=8)，不進行任何復(fù)蘇;2）ECMO聯(lián)合超濾技術(shù)復(fù)蘇組，8只(n2=8)，應(yīng)用ECMO聯(lián)合超濾對失血性休克模型進行復(fù)蘇;3）液體復(fù)蘇組，8只(n3=8)，用自體血和乳酸林格氏液進行復(fù)蘇。
　　(2)

4、在復(fù)蘇后觀察并記錄各組實驗兔的平均動脈壓。分別于休克前、休克后及復(fù)蘇后采集血液標(biāo)本，檢測此三個時間點的血液標(biāo)本中乳酸(Lactic acid)、血肌酐(SCr)、白細胞介素-6(IL-6)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的水平，記錄數(shù)據(jù)后通過單因素方差分析進行比較。
　　(3)每組實驗兔在復(fù)蘇后觀察2小時，然后處死實驗兔采集腎臟組織標(biāo)本。用腎臟組織標(biāo)本制作石蠟切片，然后做以下處理:1）HE染色，觀察各組實驗兔腎臟組織病理學(xué)改變的差

5、異;2）免疫組織化學(xué)染色，用免疫組織化學(xué)法檢測各組實驗兔腎臟組織中熱休克蛋白-70(heat shock protein70)的表達程度，并對此蛋白的表達進行定量分析，比較其在各組實驗兔腎臟組織中表達的強弱。
　　實驗結(jié)果:
　　(1)三個組復(fù)蘇后的平均動脈壓比較，液體復(fù)蘇組明顯高于未復(fù)蘇組(P＜0.05)，ECMO聯(lián)合超濾復(fù)蘇組明顯高于液體復(fù)蘇組和未復(fù)蘇組(P＜0.05);
　　(2)血肌酐的水平，休克后較休克前明顯

6、升高(P＜0.05)。復(fù)蘇后，液體復(fù)蘇組較休克未復(fù)蘇組明顯降低(P＜0.05)，ECMO聯(lián)合超濾技術(shù)復(fù)蘇組較液體復(fù)蘇組明顯降低(P＜0.05)，提示ECMO聯(lián)合超濾技術(shù)復(fù)蘇與液體復(fù)蘇相比，對減輕腎功能的下降有明顯作用。IL-6、TNF-α和乳酸的水平與血肌酐的水平有相同的趨勢，提示ECMO聯(lián)合超濾復(fù)蘇與液體復(fù)蘇相比，可以使組織得到更好的灌注，可以更有效的去除血液中的炎癥因子，降低炎癥反應(yīng)的發(fā)生率，從而減輕炎癥反應(yīng)對腎臟組織造成的損傷;<

7、br>　　(3) HE染色，ECMO聯(lián)合超濾技術(shù)復(fù)蘇組腎臟組織損傷程度及炎癥因子浸潤程度較液體復(fù)蘇組和未復(fù)蘇組明顯減輕，提示ECMO聯(lián)合超濾復(fù)蘇和液體復(fù)蘇相比，可以更有效的減輕腎臟組織的損傷，液體復(fù)蘇組腎臟組織損傷程度和未復(fù)蘇組相似，提示液體復(fù)蘇對減輕腎臟損傷作用不明顯;
　　(4)熱休克蛋白-70在ECMO聯(lián)合超濾技術(shù)復(fù)蘇組的腎臟組織中的表達要明顯低于傳統(tǒng)液體復(fù)蘇組和未復(fù)蘇組，提示ECMO聯(lián)合超濾復(fù)蘇與液體復(fù)蘇相比，可以明顯的減