B型鈉尿肽受體在快速起搏家兔房顫心房組織中的表達(dá).pdf

1、背景和目的：心房顫動(dòng)（房顫）是最常見(jiàn)的心律失常之一，臨床危害嚴(yán)重，雖然通常認(rèn)為房顫的發(fā)展是由于心房壓力增加或心房擴(kuò)張引起，但沒(méi)有直接的證據(jù)證明它，其確切的發(fā)病機(jī)理仍不清楚。臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，房顫時(shí)血清ANP和BNP濃度增高，且其水平變化與房顫病程有關(guān)。鈉尿肽與其受體（NPR）結(jié)合增加cGMP濃度而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，已證明心臟中存在B型鈉尿肽受體（NPR-B/pGC）-cGMP信號(hào)系統(tǒng)，但是NPR-B/pGC在心房顫動(dòng)心房組織中的變化及其病

2、理生理學(xué)效應(yīng)尚不清楚。因此，本文就NPR-B/pGC在快速起搏家兔房顫心房組織中的表達(dá)變化進(jìn)行了研究。
　　方法：快速心房起搏模型的建立，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物取新西蘭大耳白兔，雌雄不限，體重為（2.5±0.5）kg，取16只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為起搏8 h和對(duì)照組（假手術(shù)組，僅麻醉和置入電極而不起搏），每組各為8只。給予20％烏拉坦1g/kg經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉，取頸部切口，分離出右側(cè)頸外靜脈穿刺，置入5 F電極導(dǎo)管，J形電極置于右心房，用于起搏。應(yīng)用

3、RM6240生物信號(hào)系統(tǒng)，同時(shí)記錄體表肢體導(dǎo)聯(lián)心電圖，采用連續(xù)單刺激模式，起搏頻率600次/分，強(qiáng)度3.7V。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取血以備測(cè)定血中ANP濃度，取心房組織部分固定，部分液氮凍存。利用放射免疫分析技術(shù)、HE染色、免疫組織化學(xué)、Western blot及ELISA法，分別測(cè)定血中ANP濃度，心房組織形態(tài)學(xué)變化，NPR-B蛋白的表達(dá)以及膜結(jié)合型鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶活性。
　　結(jié)果：1.放射免疫技術(shù)測(cè)定假手術(shù)組和起搏8h組家兔血漿中 ANP濃

4、度分別為0.239±0.0350.027和0.386±0.086μg/L，起搏8 h組家兔血漿中ANP濃度明顯升高，與假手術(shù)組相比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01)。2. HE染色結(jié)果顯示，心房心肌纖維呈長(zhǎng)帶狀，多數(shù)有分支，其分支相互連接網(wǎng)狀。細(xì)胞核呈卵圓形，位于中央，可見(jiàn)明暗相間的橫紋，但是假手術(shù)組和起搏8h組家兔之間無(wú)明顯的變化。3.利用免疫組化觀(guān)察心肌中NPR-B的表達(dá)結(jié)果顯示，假手術(shù)組和起搏8h組心肌細(xì)胞NPR-B均呈陽(yáng)性，可

5、觀(guān)察到散在分布的棕色顆粒，但是 NPR-B的染色無(wú)明顯的變化。Western blot對(duì)NPR-B進(jìn)行定量結(jié)果也顯示，假手術(shù)組和起搏8h組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。4.利用ELISA法間接測(cè)定膜結(jié)合型鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶（pGC）活性結(jié)果，8h組pGC活性與假手術(shù)組相比明顯提高。
　　結(jié)論：1.家兔快速起搏心房顫動(dòng)模型中，血液ANP濃度明顯升高。
　　2.房顫家兔心房肌與假手術(shù)組相比,心肌細(xì)胞膜上NPR-B的表達(dá)無(wú)明顯的變化，但是其細(xì)胞膜上