ACE2在快速心房起搏誘導(dǎo)豬持續(xù)性房顫結(jié)構(gòu)重構(gòu)中的作用.pdf

1、目的: 通過(guò)快速右心房起搏構(gòu)建豬的慢性持續(xù)性房顫模型，觀測(cè)心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)的變化，同時(shí)對(duì)比研究豬的正常和房顫心房肌組織中ACE2的表達(dá)變化，探討其與心房重構(gòu)的關(guān)系；進(jìn)一步觀察應(yīng)用替米沙坦干預(yù)后心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)及房顫心房肌組織中ACE2表達(dá)的變化，探討ACE2能否成為房顫治療的新靶點(diǎn)，并為ARB類藥物治療房顫提供可能的新理論依據(jù)。
　　 方法:18只健康小豬隨機(jī)分為3組，分別為正常對(duì)照組(假手術(shù)組)、快速心房起搏組(RAP組)、血管緊張素

2、II受體抑制劑組(起搏+替米沙坦，ARB組)，每組各6頭豬。對(duì)照組安置起搏器(AOO)但不行起搏刺激，其余各組安置起搏器，給予500次/min的快速右心房起搏2周，制成慢性房顫實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。各組均給予相同飼料喂養(yǎng)，同時(shí)，替米沙坦(60mg/kg/day)混于飼料中，并提前3天應(yīng)用于ARB組； 監(jiān)測(cè)各組實(shí)驗(yàn)豬一般狀況；實(shí)驗(yàn)前后行經(jīng)胸心臟超聲觀測(cè)豬收縮末期心房面積大小變化；進(jìn)行心內(nèi)電生理刺激檢測(cè)房顫的誘發(fā)率和房顫的持續(xù)時(shí)間。2周后處死所有實(shí)驗(yàn)豬

3、，開胸取材后通過(guò)HE染色檢測(cè)心房肌病理改變；心房肌組織Masson三色染色檢測(cè)膠原沉積；免疫組化染色方法觀察心房組織ACE2蛋白表達(dá)及定位；Western Blot檢測(cè)心房組織ACE2和膠原蛋白-I的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果:
　　 ①實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)RAP組左、右心房面積同對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)開始時(shí)相比明顯增加(P<0.05)；ARB干預(yù)組面積大于正常對(duì)照組，但與RAP組相比明顯減少(P<0.05)。
　　 ②電生理特性：3組

4、開始時(shí)均未誘發(fā)出房顫；2周后正常對(duì)照組仍未誘發(fā)出房顫， RAP組較ARB組持續(xù)性房顫的誘發(fā)率明顯升高、持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)(P<0.05)。
　　 ③HE染色可見：正常對(duì)照組心房組織的心肌細(xì)胞排列整齊，結(jié)構(gòu)正常；RAP組心房組織的心肌細(xì)胞排列紊亂，出現(xiàn)局灶性壞死，間質(zhì)膠原結(jié)締組織增生，纖維化，瘢痕形成，可見炎性細(xì)胞浸潤(rùn)心肌細(xì)胞；ARB組排列較RAP組整齊，可見少量纖維組織填充、間質(zhì)水腫及少量單核細(xì)胞。
　　 ④Masson三色染

5、色可見：正常心房組織膠原陽(yáng)性染色很少，房顫心房組織膠原陽(yáng)性染色明顯增多，ARB組心房組織膠原陽(yáng)性染色明顯減少。
　　 ⑤免疫組化染色可見：ACE2蛋白主要在心房組織的心肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)，RAP組心房組織ACE2陽(yáng)性染色較正常對(duì)照組明顯減少，ARB干預(yù)組ACE2陽(yáng)性染色較RAP組明顯增加，接近正常對(duì)照組。
　　 ⑥與正常對(duì)照組比較，RAP組膠原蛋白-I的表達(dá)明顯增加(P<0.05)；ARB組膠原蛋白-I的表達(dá)較RA

6、P組明顯降低(P<0.05)，但高于正常對(duì)照組(P<0.05)。
　　 ⑦與正常對(duì)照組比較，RAP組ACE2蛋白表達(dá)則明顯降低(P<0.05)，替米沙坦干預(yù)組ACE2蛋白表達(dá)較RAP組明顯增加(P<0.05)，同正常對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 ⑧實(shí)驗(yàn)2周后，右心房的面積與膠原蛋白-I的蛋白表達(dá)呈正相關(guān)（r =0.956 P<0.01），與ACE2蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r =﹣0.966，P<0.01），膠原蛋白-I的蛋白表達(dá)