浙江地區(qū)漢族人群IL-27p28基因多態(tài)性與克羅恩病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　克羅恩病(Crohn disease CD)是一種慢性非特異性胃腸道炎癥性疾病，其病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，目前認(rèn)為是由環(huán)境、遺傳、感染、免疫等多種因素相互作用所致。近年來研究發(fā)現(xiàn)，腸道黏膜免疫異常在炎癥性腸病(Inflammatory boweldisease，IBD)發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用，其中細(xì)胞因子調(diào)節(jié)在介導(dǎo)這一免疫反應(yīng)異常中扮演重要角色。IL-27是新近發(fā)現(xiàn)的一種異源二聚體細(xì)胞因子，有特異的亞單位IL-2

2、7 p28和EBI3組成;隸屬于IL-6/IL-12家族。IL-27主要表達(dá)于髓細(xì)胞系，主要有活化的單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等抗原遞呈細(xì)胞產(chǎn)生。與IL-12具有相似的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能，參與多種免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等疾病的免疫調(diào)節(jié)過程。目前已知，IL-27p28基因的3個多態(tài)性位點分別為:啟動子區(qū)g.-964T＞C、第2外顯子區(qū)g.2905T＞G和第4外顯子區(qū)g.4730T＞C。2009年，Li等韓國學(xué)者發(fā)現(xiàn)，位于IL-27p28基因

3、多態(tài)性可能與韓國人群CD易感性相關(guān)。筆者在這一發(fā)現(xiàn)的基礎(chǔ)上通過分析該位點多態(tài)性，探討其與浙江地區(qū)漢族人群CD發(fā)病的相關(guān)性。
　　研究對象與方法
　　1.研究對象:
　　選取2007-01-2011-12在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院（40例）和上虞市人民醫(yī)院消化內(nèi)科（35例）就診或住院且臨床資料完整、彼此無血緣關(guān)系的75例漢族CD患者，其中男41例，女34例，年齡8～67歲，平均(37.43±12.45)歲，平均病程(5

4、.37±4.29)年，CD活動指數(shù)183.47±53.61。選擇同期健康體檢者80例作為對照，其中男45例，女35例，年齡18～60歲，平均(36.21±11.54)歲。CD的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會炎癥性腸病協(xié)作組制定的《中國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識意見》。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)非漢族人口;(2)合并其他自身免疫性疾病;(3)嚴(yán)重心、肺、肝、腎功能損害和神經(jīng)、精神疾病;(4)糖尿病以及其他內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病;(5)近期有明確感染病

5、史:近1個月曾使用糖皮質(zhì)激素;近3個月曾使用免疫抑制劑;(6)服用避孕藥的育齡女性、孕期和哺乳期婦女;(7)創(chuàng)傷患者。兩組性別、年齡的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.研究方法:
　　所有研究對象IL-27p28位點等位基因的多態(tài)性監(jiān)測應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-連接酶檢測(polymerase chain reaction-ligase detection reaction,PCR-LDR)。
　　3.統(tǒng)計方法:

6、r>　　采用SHEsis軟件進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡吻合度檢驗，確定對照組是否可以代表浙江地區(qū)漢族群體。采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料組間比較采用x2檢驗，并用logistic回歸計算各位點的優(yōu)勢比(Odds ratio，OR)評估相對危險度，計算95％可信區(qū)間(confidence interval，CI)。P＜0.05表示有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果與討論
　　本實驗研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn):IL-27p28基因檢

7、測結(jié)果顯示，兩組g.-964位點的基因頻率及等位基因頻率的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05，OR=1.94，95％CI=1.22-3.10)，提示該位點的多態(tài)性可能與浙江地區(qū)漢族人群CD易感性有關(guān);而g.2905和g.4730位點的基因頻率及等位基因頻率的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，提示該位點的多態(tài)性與浙江地區(qū)漢族人群CD易感性無關(guān)。
　　IL-27是新近發(fā)現(xiàn)的一種異源二聚體細(xì)胞因子，由特異的亞單位IL-27 p28和EBI3

8、組成，與其受體結(jié)合后，通過激活JAK/STATs通路途徑轉(zhuǎn)導(dǎo)信號，引起特異的生物學(xué)反應(yīng)。IL-27在免疫反應(yīng)過程中具有促炎和抗炎癥反應(yīng)的雙重免疫調(diào)節(jié)作用。在T細(xì)胞增殖分化早期，IL-27通過STAT1、STAT3途徑促進(jìn)初始CD+4T細(xì)胞分化為Th1細(xì)胞，同時可協(xié)同IL-12促進(jìn)初始CD+4T細(xì)胞分化為Th1細(xì)胞，及促進(jìn)初始T細(xì)胞、NK細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ;IL-27還可通過上調(diào)初始CD+4T細(xì)胞ICAM-1的表達(dá)，介導(dǎo)ICAM-1/LF

9、A-1信號途徑來促進(jìn)Th1細(xì)胞分化。Villarino等在IL-27R-/-小鼠模型的研究證實了IL-27R缺乏可以降低結(jié)腸炎的發(fā)病率。這些研究充分證明了IL-27在CD的炎癥進(jìn)展過程中發(fā)揮重要的免疫調(diào)節(jié)作用，IL-27可能是CD易感性研究的一個重要的候選基因。
　　本研究中IL-27位點基因型分布符合Hardy—Weinberg平衡定律，說明選擇樣本具有群體代表性。本研究結(jié)果顯示，兩組IL-27啟動子區(qū)-964 T＞C的基因型頻

10、率及等位基因頻率分布的差異有統(tǒng)計學(xué)意義，提示該位點的多態(tài)性可能與浙江地區(qū)漢族人群CD易感性相關(guān)，這與Li等的韓國IBD人群易感性研究結(jié)果相同。同時，雖然本研究中g(shù).2905T＞G和g.4730T＞C2個位點的基因多態(tài)性與浙江地區(qū)漢族人群CD易感性未發(fā)現(xiàn)有相關(guān)性，其原因可能有種族差異、樣本數(shù)量不足等不確定因素，不排除這2個位點與其他人群CD具有相關(guān)性，也不排除IL-27基因其他位點與CD的發(fā)生具有相關(guān)性。
　　由于本研究病例數(shù)及地域

11、較局限，故仍需行多中心大樣本的隊列研究，才能最終明確該基因多態(tài)性與中國漢族IBD發(fā)病的相關(guān)性，為進(jìn)一步篩選中國人IBD的易感基因以及未來發(fā)展基因診斷和治療提供依據(jù)。
　　結(jié)論:
　　1、g.-964位點的基因頻率及等位基因頻率與健康對照組有差異，提示該位點的多態(tài)性可能與浙江地區(qū)漢族人群CD易感性有關(guān)
　　2、而g.2905和g.4730位點的基因頻率及等位基因頻率與健康對照組無差異，提示該位點的多態(tài)性與浙江地區(qū)漢族人群