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1、研究目的:
膿毒癥在急診有著高發(fā)病率和高致死率,心功能障礙是膿毒癥的嚴(yán)重并發(fā)癥。目前對(duì)膿毒癥心功能障礙的研究較多,但血管再生在膿毒癥心功能障礙中的作用尚無報(bào)道,因此對(duì)膿毒癥心功能障礙時(shí)血管再生的作用及相關(guān)機(jī)制進(jìn)行研究,為膿毒癥的臨床診治提供了理論基礎(chǔ)。
方法:
將60只8周齡的雄性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為4組,實(shí)驗(yàn)組共3組(n=15)和對(duì)照組(n=15),實(shí)驗(yàn)組給以脂多糖(LPS)腹腔注射(1
2、0mg/kg),對(duì)照組給以生理鹽水腹腔注射(10mg/kg),實(shí)驗(yàn)組分別于LPS處理6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)后超聲觀察小鼠心功能(n=12),對(duì)照組于24h后觀察心功能(n=12)。然后,取小鼠心臟、肺臟、腎臟組織經(jīng)石蠟包埋和HE染色(n=6)觀察病理學(xué)變化并鑒定模型,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法(n=3)檢測(cè)PECAM-1、α-SMA在不同組別心臟中的表達(dá)水平,TUNLE染色法(n=3)檢測(cè)小鼠心肌細(xì)胞凋亡情況。通過RT-PCR技術(shù)檢測(cè)小
3、鼠心肌血管再生因子(VEGF、HIF-1α),應(yīng)用Westernblot方法檢測(cè)小鼠心臟p53與HIF-1α的表達(dá)水平,并應(yīng)用ELISA法檢測(cè)VEGF及炎癥因子(TNF-α、IL-6)的表達(dá)水平。
結(jié)果:
與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組小鼠心臟左室舒張期前壁厚度、左室收縮期前壁厚度增厚(P<0.05),左心室舒張期內(nèi)徑增加、每搏輸出量降低(P<0.05),免疫組化結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠心臟中新生血管數(shù)量較對(duì)照組增加(P<0
4、.05),TUNEL結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠心肌細(xì)胞凋亡數(shù)量增多(P<0.05),RT-PCR結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠心臟中VEGF、HIF-1α表達(dá)量增高(P<0.05),Westernblot結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組HIF-1α、p53的表達(dá)水平增高(P<0.05),ELISA結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組VEGF、TNF-α、IL-6等細(xì)胞因子表達(dá)水平較對(duì)照組增高(P<0.05)。
結(jié)論:
膿毒癥心功能障礙過程中存在心肌血管再生及細(xì)
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