龍膽苦苷對膿毒癥急性肺損傷小鼠的保護作用.pdf

1、目的:觀察龍膽苦苷對膿毒癥所致的小鼠急性肺損傷的保護作用，并初步探索其作用機制。
　　方法:采用盲腸結扎穿孔(cecal ligation and puncture，CLP)的方法建立小鼠膿毒癥(sepsis)急性肺損傷(acute lung injury，ALI)模型。18～22g雄性昆明小鼠隨機分為假手術組、模型組、龍膽苦苷低劑量組(25mg/kg)、龍膽苦苷高劑量組(50mg/kg)。給藥物組于術前半小時尾靜脈注射龍膽苦苷溶

2、液，假手術及模型組注射等體積的生理鹽水。術后12h收集肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BLAF)，檢測其中炎癥因子(TNF-α、IL-6)及總蛋白含量;測定肺組織中丙二醛(MDA)、髓過氧化物酶(MPO)、誘導型一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮(NO)含量;肺組織HE染色，光鏡下觀察病理改變情況;western blot檢測肺組織TLR4以及NF-κB的表達情況。
　　結果:模型組術后12

3、h肺組織中MDA、MPO、iNOS、NO水平較假手術組明顯升高，肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6含量及總蛋白含量也遠遠高于假手術組;肺組織病理切片HE染色后光鏡下觀察，假手術組肺泡結構清晰，無明顯病理變化;模型組肺泡壁明顯水腫、增厚、炎性細胞和紅細胞浸潤，肺泡結構遭到破壞;術后12h，龍膽苦苷低、高劑量組肺組織中MDA、MPO、iNOS、NO水平與模型組相比有明顯的降低(P＜0.05或0.01)，肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6含量及總

4、蛋白含量均顯著低于模型組(P＜0.05或0.01)，肺組織病理損傷明顯減輕但仍有一定程度的炎性細胞浸潤以及充血水腫，以高劑量組改善最顯著。western blot檢測的結果顯示，假手術組肺組織中TLR4受體及NF-κB蛋白表達都十分微弱，而模型組TLR4與NF-κB蛋白均呈強表達，龍膽苦苷兩給藥組TLR4及NF-κ B蛋白表達水平均明顯低于模型組，且高劑量組下調(diào)的程度較低劑量組更明顯。此外，與模型組相比，給藥組中NF-κB表達下調(diào)的幅度