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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
了解輪狀病毒感染膽管上皮細(xì)胞對(duì)HMGB1 mRNA表達(dá)及蛋白釋放的影響。
方法:
1.體外培養(yǎng)小鼠膽管上皮細(xì)胞,設(shè)立對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組接種輪狀病毒,對(duì)照組接種等量病毒培養(yǎng)液,24小時(shí)后免疫組化分析HMGB1表達(dá)。
2.體外培養(yǎng)小鼠膽管上皮細(xì)胞,設(shè)對(duì)照組、病毒組、SiRNA組,分別于12h、24h、36h、48h收集細(xì)胞和培養(yǎng)上清,RT-PCR及ELISA分別檢測(cè)膽管上皮
2、細(xì)胞HMGB1 mRNA表達(dá)及培養(yǎng)上清蛋白表達(dá)。
結(jié)果:
1.HMGB1存在于正常膽管上皮細(xì)胞的胞核。
2.病毒感染后胞核HMGB1含量較正常明顯下降。
3.12h、24h膽管上皮細(xì)胞HMGB1 mRNA表達(dá):病毒組表達(dá)較對(duì)照組升高(P<0.01),SiRNA組表達(dá)較病毒組降低(P<0.01)。
4.36h、48h細(xì)胞培養(yǎng)上清HMGB1濃度:病毒組HMGB1蛋白濃度較
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