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文檔簡介
1、目的:單核細(xì)胞與腎小管上皮細(xì)胞(TEC)的粘附及其造成的相互反應(yīng)是促進(jìn)腎臟纖維化的重要環(huán)節(jié)。中藥蟲草多糖(CP)對多種腎臟疾病的腎損傷具有抑制作用,我們以往的研究證實TEC表面透明質(zhì)酸(HA)條索狀結(jié)構(gòu)可通過與單核細(xì)胞結(jié)合,競爭性抑制ICAM-1介導(dǎo)的粘附作用。本研究目的在于進(jìn)一步闡明CP對于TEC表面HA表達(dá)分布以及單核細(xì)胞粘附的影響。
方法:應(yīng)用人近端腎小管上皮細(xì)胞株HK-2細(xì)胞與人單核細(xì)胞系U937作為細(xì)胞培養(yǎng);CP
2、-F1組分刺激HK-2細(xì)胞24小時后在細(xì)胞層中加入U937細(xì)胞,采用BCECF-AM熒光染料法測定單核細(xì)胞粘附；HK-2上清液、細(xì)胞周圍及細(xì)胞底層HA通過不同方法分離提取,用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測HA表達(dá)。
結(jié)果:CP-F1誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞明顯增加U937粘附(P<0.05),以濃度為5mg／ml的CP-F1刺激HK-2細(xì)胞24小時可促進(jìn)HA表達(dá)量增加,同時其分布發(fā)生變化,細(xì)胞周圍HA(Trypsin extr
3、act fraction,TE-HA)和細(xì)胞底層HA(Cell associated fraction,CA-HA)表達(dá)增加(P<0.05),而培養(yǎng)液中HA(Conditioned Medium fraction,CM-HA)則無明顯變化。用透明質(zhì)酸酶(Hyal)去除HK-2細(xì)胞表面的HA可明顯抑制單核細(xì)胞粘附(P<0.05)。
結(jié)論:1、蟲草多糖可以調(diào)節(jié)腎小管細(xì)胞表面透明質(zhì)酸的總量和分布變化；
2、蟲草多糖
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