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1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文IL1α和CSF1對(duì)大鼠牙囊細(xì)胞蛋白質(zhì)組影響的實(shí)驗(yàn)研究姓名:謝楠申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):口腔基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:凌均棨20100518中山大學(xué)學(xué)位論文IL1a和CSFI對(duì)大鼠牙囊細(xì)胞蛋白組影響的實(shí)驗(yàn)研究OPG條帶無(wú)明顯變化趨勢(shì)。③獲得了IL1a或CSFI刺激后牙囊細(xì)胞蛋白的雙向電泳圖譜,DeCyderV60軟件分析共確認(rèn)平均表達(dá)大于15陪的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)47個(gè),質(zhì)譜鑒定40個(gè)蛋白斑點(diǎn)。其中IL1a組和對(duì)照組間差異表達(dá)的蛋白
2、質(zhì)斑點(diǎn)37個(gè),31個(gè)表達(dá)上調(diào)的蛋白主要有熱休克蛋白Dl(HeatshockproteinbetaI、HSP27、HSP25)、波形蛋白(Vimentin)、跨膜蛋白43(TMEM43)、小G蛋白R(shí)ab3D(GTPbindingproteinRab一3D)、6一丙酮酰一四氫生物喋呤合成酶(6pyruvoyltetrahydrobiopterinsynthase)、肌動(dòng)蛋白(Actin)等,6個(gè)表達(dá)下調(diào)的蛋白為血清白蛋白(Serumalbu
3、min)、PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白(GIPCI)、DNA引發(fā)酶大亞基(DNApdmaselargesubunit)、Cullin一5、細(xì)胞周期蛋白GI(CyclinG1);CSF—l組和對(duì)照組間差異表達(dá)的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)10個(gè),3個(gè)上調(diào)的蛋白為小G蛋白R(shí)ab一3D(GTPbindingproteinRab3D)和Q肌動(dòng)蛋白(Alphaactin),7個(gè)下調(diào)的蛋白有Cullin5、血清白蛋白(Serumalbumin)、PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白(GIPCI)、
4、細(xì)胞周期蛋白GI(CyclinG1)等。westernblot結(jié)果顯示50ng/mlIL1a刺激牙囊細(xì)胞12小時(shí)后Vimentin的表達(dá)上調(diào),50ng/mlCSF1孵育牙囊細(xì)胞12小時(shí)后Rab一3D表達(dá)上調(diào),與蛋白質(zhì)組學(xué)分析的結(jié)果一致。結(jié)論:①用組織塊結(jié)合酶消化法分離培養(yǎng)的大鼠牙囊細(xì)胞為間充質(zhì)來(lái)源,可作為蛋白質(zhì)組學(xué)研究的細(xì)胞模型。②IL1a、CSF1均可上調(diào)大鼠牙囊細(xì)胞OPG蛋白水平。⑨獲得了CSF1、IL1a刺激后大鼠牙囊細(xì)胞的差異蛋
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