紅松多酚分離鑒定及對輻射誘導氧化傷害的防護作用.pdf

1、紅松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc)，主要是產于黑龍江省中北部小興安嶺的珍貴樹種。紅松中含有大量的酚類化合物，包括萜類、多酚類、生物堿等多種生物活性成分，具有抗輻射、抗氧化等多種生物學功能。本研究以小興安嶺的紅松為實驗原料，系統(tǒng)地研究了紅松中的多酚組成和有效成分的抗氧化及抗輻射生物活性。采用乙醇作為紅松多酚的萃取溶劑，并且研究了紅松中的有效成分的提取工藝，優(yōu)化了最佳提取工藝條件。用大孔樹脂 AB-8純化紅松

2、多酚，利用不同梯度乙醇洗脫出來的紅松多酚從清除自由基、鐵離子螯合能力以及總還原能力等體外抗氧化指標研究了紅松提取物的抗氧化活性。本實驗采用生物活性跟蹤方法，通過體外抗氧化性篩選出生物活性較強組分進行人體外周血白細胞和動物抗輻射實驗，并且利用半制備液相色譜技術二級純化紅松多酚，最后用高效液相色譜鑒定紅松提取物中的多酚組分。本研究的主要內容如下：
　　(1)紅松多酚萃取溶劑的篩選，選取了甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和水五種溶劑萃取紅松多

3、酚，其中乙醇提取物得率高達到7.78mg/g，確定乙醇作為萃取溶劑。
　　(2)采用超聲波法提取紅松中的多酚成分，通過單因素試驗確定影響多酚得率的因素及條件，在單因素試驗的基礎上，結合響應面方法優(yōu)化提取工藝，在固定超聲功率160W前提下，得到最佳提取工藝條件為超聲時間30.61min、料液比1:30.79和乙醇濃度42.20％。響應面模型在此條件下紅松多酚提取率為8.241mg/g。
　　(3)本實驗采用生物活性跟蹤方法，用

4、 AB-8大孔樹脂一級純化紅松多酚，乙醇作為洗脫劑，得到20％，40％，60％不同濃度的乙醇洗脫物，冷凍干燥成紅松多酚粉末。通過體外的生物活性指標包括羥基自由基(·OH)、超氧陰離子(O2－·)、ABTS自由基和 DPPH自由基，鐵離子螯合能力以及總還原能力考察生物活性比較強的組分，結果40％的乙醇洗脫物的生物活性要明顯高于其它組分。
　　(4)用半制備液相色譜技術二級純化40％的乙醇洗脫物，得到高純度的紅松多酚，然后用高效液相色

5、譜對其多酚組分進行分析，結果多酚含量最多的是香豆酸（321.4±1.0mg/100g)、水楊酸(117.7±3.1mg/100g)和香草酸（101.3±2.8mg/100g），其次是咖啡酸（54.2±3.2mg/100g)和兒茶素（25.3±1.9mg/100g)，含量最少的成分是黃芩苷(8.05±1.2mg/100g)。
　　(5)當人體外周血白細胞受到電離輻射之后，不同劑量組的紅松多酚對白細胞數量的影響明顯要高于輻射對照組，出