芍藥苷在正常大鼠體內(nèi)的多劑量藥物動力學(xué)研究.pdf

1、白芍總苷(total glucosides of paeony，TGP)是已經(jīng)上市用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)的藥物，具有明顯的抗炎、鎮(zhèn)痛、免疫調(diào)節(jié)等作用。雖然TGP治療RA是有效的，安全的，但TGP仍存在一些不足，包括起效較慢、療效個體差異大、主要作用機(jī)制和作用靶點(diǎn)以及藥動學(xué)特點(diǎn)不清楚等。芍藥苷(paeoniflorin，Pae)是TGP主要有效成分，研究表明Pae同樣具有良好的抗炎免疫調(diào)節(jié)作

2、用。對Pae前期的一些藥動學(xué)研究表明，Pae血藥濃度較低，一般情況下HPLC方法難以檢測，因此建立靈敏度更低、專屬性更強(qiáng)的生物樣品分析方法將更加有利于探討Pae的藥動學(xué)過程。
　　 目的：建立生物樣本中Pae定量分析的方法,探討Pae在大鼠體內(nèi)的多劑量藥動學(xué)過程及特點(diǎn)。
　　 方法：采用四級桿質(zhì)譜儀進(jìn)行選擇反應(yīng)檢測（SRM），電噴霧離子源，進(jìn)行色譜分析?？疾?個劑量芍藥苷灌胃給藥后，大鼠體內(nèi)的藥物動力學(xué)特征。血漿樣品用乙

3、酸乙酯萃取，氮?dú)獯蹈珊笥眉状既芙?，?0μl上清液進(jìn)樣；分別測定正常大鼠灌胃給予 Pae后各個時間點(diǎn)的血藥濃度和組織濃度，將血藥濃度-時間（C-t）數(shù)據(jù)經(jīng)DAS ver 2.0軟件擬合，進(jìn)行房室模型判別及相關(guān)藥動學(xué)參數(shù)計算。
　　 結(jié)果：⑴建立可靠的生物樣品測定方法是本課題研究的基礎(chǔ)。我們通過特異性、靈敏度、精密度、穩(wěn)定性等考察，在檢測過程中進(jìn)行方法學(xué)質(zhì)控，制備隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線計算Pae的濃度。色譜條件：色譜柱為島津ODS (250

4、mm×2.0mm,3μm），流動相為甲醇：0.1％甲酸溶液（70：30）。采用四級桿質(zhì)譜儀進(jìn)行選擇反應(yīng)檢測，電噴霧離子源。生物樣品預(yù)處理采用乙酸乙酯液－液萃取法。通過該測定方法，Pae峰與雜質(zhì)峰可完全分離，具有較高的專屬性，生物樣品中雜質(zhì)不干擾樣品測定。血漿中最低檢測限為5ng/ml，線性范圍：5-5000 ng/ml；組織中最低檢測限為1ng/ml，線性范圍：1-2000 ng/ml；生物樣品相對回收率>90％，日內(nèi)和日間RSD均<1

5、5.0％，樣品在室溫放置、冷凍儲存、反復(fù)凍融條件下基本穩(wěn)定。該法符合生物樣品分析要求。⑵正常大鼠分別多次灌胃給予Pae，LC-MS方法檢測血漿中藥物濃度。正常大鼠多次灌胃給予Pae25、50、100mg/kg后，Pae體內(nèi)過程符合二室模型。從第4天Pae血藥濃度已基本穩(wěn)定,表明已達(dá)到穩(wěn)態(tài)，達(dá)穩(wěn)態(tài)后其主要藥動學(xué)參數(shù)分別為：分布相半衰期（T1/2α，h）為1.138±0.370、1.869±0.933、1.571±0.638；消除相半衰期(

6、T1/2β，h)為2.242±0.552、2.598±0.904、2.169±0.603；清除率(CL/F，L·h-1·kg-1) 為8.744±1.027、8.390±2.209、4.867±1.110；達(dá)峰時間(Tmax，h)為3.400±0.548、4.000±0.707、3.800±0.447；峰濃度(Cmax，μg·L-1)為80.407±12.21、184.136±73.359、358.902±188.463；平均穩(wěn)態(tài)血藥濃

7、度（Cav，μg/L）為23.316±2.855、51.271±22.694、86.658±21.613；波動系數(shù)（DF）為3.174±0.2、3.364±0.533、3.715±1.093；藥時曲線下面積(AUCss,μg·h·L-1)為559.567±68.531、1230.510±544.655、2079.780±518.733；藥時曲線下面積(AUC(0-∞)，μg·h·L-1)為578.600±72.180、1299.254±

8、512.031、2164.384±610.170。⑶Pae灌胃給予50mg/kg后，Pae在各主要組織中均有分布，其中以肝、腎的藥物濃度最高，各組織中藥物消除較快，在給藥后4h，藥物消除近一半，在9h幾乎完全消除，表明該藥物經(jīng)口服給藥后不易在體內(nèi)產(chǎn)生蓄積。
　　 結(jié)論：①在生物樣品中建立了穩(wěn)定、可靠的Pae LC-MS分析方法；②對Pae在大鼠體內(nèi)的多劑量藥動學(xué)過程進(jìn)行研究，探討Pae在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)特征。灌胃給予Pae25、