多烯紫杉醇羥丙基-磺丁基-β-環(huán)糊精包合物凍干粉質(zhì)量評價及藥代動力學(xué)研究.pdf

1、多烯紫杉醇（Docetaxel，商品名為Taxotere）是新一代紫杉烷類抗腫瘤藥物，對乳腺癌、非小細胞肺癌、胰腺癌、頭頸癌、卵巢癌以及前列腺癌等均具有良好療效。目前，多烯紫杉醇上市劑型為注射用濃溶液，該劑型穩(wěn)定性較差，臨床用藥不方便并時常引發(fā)嚴重的過敏反應(yīng)。利用羥丙基-磺丁基-β-環(huán)糊精作為藥物賦形劑水溶性好、溶血性小、毒性低的特點，實驗室開發(fā)了多烯紫杉醇羥丙基-磺丁基-β-環(huán)糊精包合物凍干粉制劑，以期達到避免或者緩解現(xiàn)有制劑缺點的目

2、的。 本文建立了多烯紫杉醇凍干粉質(zhì)量的高效液相（HPLC）分析方法，以及生物樣本（血漿和組織）中多烯紫杉醇的檢測方法，進行了該制劑質(zhì)量的評價和動物體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究，為制劑的有效性和安全性評價提供方法學(xué)基礎(chǔ)；首次提出基于電紡尼龍6納米纖維的固相膜萃取技術(shù)，并以多烯紫杉醇為目標(biāo)分子，進行了這一樣品前處理的新技術(shù)在生物樣本分析中的應(yīng)用研究。論文主要工作如下： 一、反相高效液相色譜-紫外法測定多烯紫杉醇凍干粉含量及有關(guān)物質(zhì)

3、 采用Dikma Platisil C18柱（150mm×4．6mm，5μm），檢測波長227nm，柱溫：30℃。有關(guān)物質(zhì)檢查時以乙腈-水（40：60，v：v）為流動相A，乙腈為流動相B，進行梯度洗脫，流速1．5mL/min；含量測定時紫杉醇為內(nèi)標(biāo)，以乙腈-水（60：40，v/v）為流動相，進行等度洗脫，流速為1．0mL/min。結(jié)果表明：多烯紫杉醇與各有關(guān)物質(zhì)分離良好。在0．05～100μg/mL的濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系（

4、r=0．9993），檢出限（LOD）為0．01μg/mL（以S/N=3計）。三個批次樣品的多烯紫杉醇標(biāo)示含量分別為98．79％、99．56％、100．9％，有關(guān)物質(zhì)含量分別為2．8％、2．2％、2．5％。本法準(zhǔn)確可靠，專屬性強，能滿足多烯紫杉醇包合物凍干粉質(zhì)量控制的要求。 二、多烯紫杉醇包合物凍干粉家兔體內(nèi)藥代動力學(xué)的研究 本文建立了靈敏、準(zhǔn)確的家兔血漿中多烯紫杉醇的HPLC-UV測定方法，為多烯紫杉醇包合物凍干粉家兔體

5、內(nèi)藥代動力學(xué)的研究提供方法學(xué)基礎(chǔ)。血漿中雜質(zhì)不干擾樣品的測定，多烯紫杉醇在0．04～10μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0．9996），檢出限為0．02μg/mL（以S/N=3計），平均提取回收率為90．1％～93．7％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為3．2％～12％。以上方法驗證結(jié)果表明，此方法滿足藥代動力學(xué)研究的要求。 采用血藥濃度法研究了多烯紫杉醇包合物凍干粉的家兔體內(nèi)藥代動力學(xué)，通過測定血藥濃度經(jīng)時變化曲線，得出了多烯紫

6、杉醇凍干粉（受試制劑）藥代動力學(xué)參數(shù)；以上市的多烯紫杉醇注射液為參比制劑，研究了受試制劑的相對生物利用度。參比制劑的t1/2β為5．32±1．72h，AUC和CL分別為1．29±0．459μg/mL·h和5．82±1．27mL/h；受試制劑t1/2β為7．00±1．90min，AUC和CL分別為1．59±0．798μg/mL·h和4．72±2．12 mL/h。其平均相對生物利用度為123％。結(jié)果表明家兔給予受試制劑t1/2β和AUC均大

7、于參比制劑，清除率CL小于參比制劑（P<0．05），提示在相同劑量的條件下，多烯紫杉醇羥丙基-磺丁基-β-環(huán)糊精包合物凍干粉在體內(nèi)可保持相對較高的血藥濃度，提高了生物利用度，在一定程度上增強藥物對腫瘤細胞的殺傷作用，從而產(chǎn)生較好的臨床效果。 三、基于電紡尼龍6納米纖維的固相膜萃取技術(shù)及其在生物樣本中的應(yīng)用研究 研究了基于電紡尼龍6納米纖維的同相膜萃取技術(shù)，研制了相應(yīng)的裝置，在此基礎(chǔ)上，對生物樣本（家兔血漿和小鼠組織）進行

8、前處理，全面考察了影響萃取效率的因素：蛋白酶的種類、酶解時間和溫度、介質(zhì)pH和離子強度、洗脫溶劑、洗脫溶劑體積，建立了基于電紡尼龍6納米纖維的固相膜萃取富集生物樣本中多烯紫杉醇的分析方法。在優(yōu)化的條件下，多烯紫杉醇平均提取回收率為72．1％～78．5％（RSD<8％），檢出限0．015μg/mL（以S/N=3計）。與傳統(tǒng)液-液萃取法、C18柱固相萃取法相比，此萃取方法解決了常規(guī)提取方法有機溶劑用最大、提取時間長、凈化效果差的缺點，不僅使