rhbFGF和rhEGF對成纖維細胞的促增殖作用.pdf

1、目的：掌握人皮膚成纖維細胞的培養(yǎng)技術(shù)，了解該細胞的生長特性；研究重組人堿性成纖維細胞生長因子(rhbFGF)和重組人表皮生長因子(rhEGF)在不同濃度下對人皮膚成纖維細胞增殖的影響，以及這兩種因子對成纖維細胞有無異常分化，從而為臨床準確定量應(yīng)用這兩種因子修復(fù)創(chuàng)面、加速創(chuàng)面愈合提供理論依據(jù)。 方法：體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細胞，用不同濃度的rhbFGF和rhEGF干預(yù)細胞，四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)檢測細胞的活性，選擇最適濃度生

2、長因子干預(yù)的細胞，用流式細胞儀檢測細胞的DNA倍體情況。 結(jié)果：①成纖維細胞生長過程的觀察：成纖維細胞傳代24h后基本貼壁，少數(shù)未貼壁的細胞在換液過程中被清除，約4天左右長滿瓶底的80％，繼續(xù)傳代。該細胞多呈長梭形生長，在瓶內(nèi)分布均勻，量多時呈柵欄狀排列。②不同濃度的rhbFGF對成纖維細胞增殖的影響：分別用不同濃度序列因子干預(yù)48小時后測定MTT值，結(jié)果顯示濃度在50ug/L時MTT值最大。③不同濃度的rhEGF對成纖維細胞增

3、殖的影響：分別用不同濃度序列因子干預(yù)48小時后測定MTT值，結(jié)果顯示濃度在80ug/L時MTT值最大。④培養(yǎng)24h時分別用流式細胞儀對rhbFGF和rhEGF最適濃度下細胞倍體的含量進行測定。 結(jié)論：rhbFGF濃度在20.100ug/L之間對人皮膚成纖維細胞有明顯的促增殖作用，其中以50ug/L作用最明顯，為最適濃度。rhEGF濃度在30-100ug/L之間對成纖維細胞均有較明顯的促增殖作用，以80ug/L作用最顯著。這兩種生