阿拉善雙峰駝乳乳鐵蛋白的分離純化及其抗菌活性研究.pdf

1、雙峰駝乳中富含多種營(yíng)養(yǎng)素外還含有許多生物活性成分，其中乳鐵蛋白在食品配方和藥物研究等方面均起著重要作用。本研究通過(guò)等電點(diǎn)沉淀、硫酸銨沉淀和凝膠層析等方法，從內(nèi)蒙古阿拉善雙峰駝乳中分離純化乳鐵蛋白，通過(guò)考馬斯亮藍(lán)方法測(cè)定不同分離純化方法所獲得的乳鐵蛋白含量，并用SDS-PAGE電泳分析了其純度和分子量。結(jié)果表明，通過(guò)兩次硫酸銨沉淀．兩次SephadexG-100柱層析分離得到純度為91％的駝乳乳鐵蛋白(CLF)。再經(jīng)凝膠成像系統(tǒng)分析確定其

2、分子量為81.42KD。 采用試管二倍稀釋法測(cè)定了駝乳鐵蛋白的抗菌活性，結(jié)果表明CLF對(duì)E.coli的最小抑菌濃度(MIC)為3mg/mL，對(duì)S.aureus的最小抑菌濃度為2mg/mL，且與溶菌酶聯(lián)合應(yīng)用，則能明顯增強(qiáng)其抗菌作用。乳鐵蛋白的抗菌活性還與其鐵飽和度密切相關(guān)，隨著鐵飽和度的增加其抗菌活性明顯下降。葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、牛血清白蛋白(BSA)、尿素、硫酸銨在0～10mg/mL，乳糖和可溶性淀粉在0～4mg/mL，酪蛋

3、白在0～1.2mg/mL的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，對(duì)CLF的抗菌活性影響不大。而NaCl或KCl的濃度為25～100mmol/L，MgCl<,2>或CaCl<,2>的濃度為1.0～5.0mmol/L時(shí)，乳鐵蛋白的抗菌活性則會(huì)明顯降低。 不同熱處理和不同pH值條件對(duì)乳鐵蛋白的抗菌活性亦有顯著影響：在一定的溫度范圍內(nèi)，隨著熱處理溫度的增加乳鐵蛋白的抗菌活性明顯下降，即經(jīng)較低溫度加熱處理后CLF能很好的保持其活性；而經(jīng)較高溫度加熱處理會(huì)使CL