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1、東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文納豆激酶基因在釀酒酵母中表達(dá)的研究姓名:孫立娜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):微生物學(xué)指導(dǎo)教師:趙敏20070601東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractNattokinase(NK)isakindoffibrinolyticenzymethatisextractedfromnatto—atraditionalfoodinJapanComparedwithotherthrombolyticdrugswhichareus
2、edincommon,NKissaferandeasiertobeabsorbedbybody,andhasmoredirectandmorepersistenteffectonthrombosis,besidesitscostislowerThereforeitcanbedevelopedasanewandpotentfibrinolyticmedicineSaccharomycescerevisiaeisrecognizedasak
3、indofsimplesinglecelleukaryotes,whichhasnotoxinandnopathogenicityIthasbeenusedinbreadandalcoholindustryforyearsandwasaffirmedbyFDAtobeakindofbiologicalsafetyThegenomicofBacillussubticisVatnatto11086wasextractedandnattoki
4、nase(NK)genewasamplifiedbyPCRandWasIinkedandtransformednepositiveplasmidpMDl8TNKWasscreenedSequenceanalysisshowedthattheNKgeneWas1192bpinlengthincludingsignalregionpreleadingregionandmatureregionfragmentsnepurposegenehad
5、95%and69%homologywiththatofaccessionNoAY2199011fromBacillussubtilisandaccessionNoDQl786581fromDouchfbacteriarcponedinNCBI,respectivelyThehomologywasmuchdifferentItindicatedthatwecantakefurtherstudyofthedifferencesaboutna
6、ttokinasegenebetweenBacillussubtilisanddouchfbacteriawhichIcadtodifferentfunctionsTherecombinantexpressionvectorpYES2NKWastransformedintoSaccharomycescerevisiaeH158competentcellTherecombinantH158NKWasinducedwith13galacto
7、seThefibrinolyticactivityoffermentationsupematantwasdeterminedwithfibrinplateTherecombinantH158NKwasconstructedsuccessfullybringsnewideastodevelopanewroutetoconstructtheefficientgenetictransformationofSaccaromycescerevis
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