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文檔簡介
1、目的:通過動物實驗,觀察和血生絡(luò)法對腦缺血再灌注后大鼠腦組織梗死區(qū)血管新生的干預(yù)情況及該法對缺血局部促血管新生因子VEGF的影響,初步探討和血生絡(luò)法是否具有促血管新生作用,并進一步闡明其機制,為臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
方法:將Wistar大鼠隨機分為正常組、假手術(shù)組、模型組、和血生絡(luò)方組,后兩組線栓法制備大鼠大腦中動脈閉塞局灶性腦缺血再灌注(MCAO/IR)模型,實驗期間,大鼠自由飲水?dāng)z食,普通飼料專人喂養(yǎng)。于術(shù)后24h灌
2、胃給藥,和血生絡(luò)方組(HXSLF)灌服等效劑量中藥(8ml/kg/d),每天分兩次灌胃;假手術(shù)組和模型組大鼠灌胃等量生理鹽水給藥期間觀察大鼠的一般狀況;分別在再灌注24h、48h、72h、7d、14d從內(nèi)眥、外眥取血留標(biāo)本備用,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)進行血清VEGF含量檢測;于6h、24h、7d進行神經(jīng)功能評分;采用免疫組化PV染色法,測定缺血局部血管和微血管密度等指標(biāo)來觀察局部血管新生情況。
結(jié)果:
3、1大鼠一般狀況的比較:和血生絡(luò)方能顯著改善腦缺血再灌注后大鼠的一般狀況:明顯改善大鼠的活動、皮毛光澤度、飲食等狀況。
2大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)功能評分:和血生絡(luò)方組(HXSLF)大鼠神經(jīng)功能評分遠(yuǎn)低于模型組大鼠(P<0.01)。
3血清VEGF含量:和血生絡(luò)方組(HXSLF)大鼠血清中各個時間點VEGF含量均顯著高于模型組和假手術(shù)組(P<0.01);模型組較假手術(shù)組血清VEGF含量在各個時間點有升高趨勢,
4、但無顯著性差異(P>0.05);并且,和血生絡(luò)方組(HXSLF)大鼠血清VEGF含量維持在較高水平,持續(xù)較長時間。
4腦梗死組織中微血管密度(MVD):假手術(shù)組與正常組比較腦組織中微血管密度(MVD)無差異(P>0.05);和血生終方組(HXSLF)與假手術(shù)組和正常組比較腦梗死組織中微血管密度(MVD)顯著升高(P<0.01);和血生絡(luò)方組(HXSLF)與模型組比較腦梗死組織中微血管密度(MVD)顯著升高(P<0.01)。
5、
結(jié)論:依據(jù)和血生絡(luò)法創(chuàng)立的和血生絡(luò)方可以有效改善動物模型的一般狀況,有效保護損傷腦組織,提高生存質(zhì)量。和血生絡(luò)方可以降低動物模型腦梗死面積,并且具有明顯的促進腦梗死局部血管新生的作用。
VEGF是一種重要的血管生成因子,特異性強有力刺激內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂,主要在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面有結(jié)合位點。缺血缺氧刺激可迅速誘導(dǎo)VEGF表達(dá)。和血生絡(luò)方可以上調(diào)血清VEGF表達(dá)強度,提示本方具有上調(diào)促血管新生因子的作用,從而促進
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