和血生絡(luò)法對(duì)腦缺血再灌注大鼠血管新生的干預(yù)作用.pdf

1、目的：通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，觀察和血生絡(luò)法對(duì)腦缺血再灌注后大鼠腦組織梗死區(qū)血管新生的干預(yù)情況及該法對(duì)缺血局部促血管新生因子VEGF的影響，初步探討和血生絡(luò)法是否具有促血管新生作用，并進(jìn)一步闡明其機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：將Wistar大鼠隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、模型組、和血生絡(luò)方組，后兩組線栓法制備大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞局灶性腦缺血再灌注（MCAO/IR）模型，實(shí)驗(yàn)期間，大鼠自由飲水?dāng)z食，普通飼料專人喂養(yǎng)。于術(shù)后24h灌

2、胃給藥，和血生絡(luò)方組（HXSLF）灌服等效劑量中藥（8ml/kg/d），每天分兩次灌胃；假手術(shù)組和模型組大鼠灌胃等量生理鹽水給藥期間觀察大鼠的一般狀況；分別在再灌注24h、48h、72h、7d、14d從內(nèi)眥、外眥取血留標(biāo)本備用，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）進(jìn)行血清VEGF含量檢測(cè)；于6h、24h、7d進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分；采用免疫組化PV染色法，測(cè)定缺血局部血管和微血管密度等指標(biāo)來(lái)觀察局部血管新生情況。
　　 結(jié)果：
　　

3、1大鼠一般狀況的比較：和血生絡(luò)方能顯著改善腦缺血再灌注后大鼠的一般狀況：明顯改善大鼠的活動(dòng)、皮毛光澤度、飲食等狀況。
　　 2大鼠腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)功能評(píng)分：和血生絡(luò)方組（HXSLF）大鼠神經(jīng)功能評(píng)分遠(yuǎn)低于模型組大鼠（P<0.01）。
　　 3血清VEGF含量：和血生絡(luò)方組（HXSLF）大鼠血清中各個(gè)時(shí)間點(diǎn)VEGF含量均顯著高于模型組和假手術(shù)組（P<0.01）；模型組較假手術(shù)組血清VEGF含量在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)有升高趨勢(shì)，

4、但無(wú)顯著性差異（P>0.05）；并且，和血生絡(luò)方組（HXSLF）大鼠血清VEGF含量維持在較高水平，持續(xù)較長(zhǎng)時(shí)間。
　　 4腦梗死組織中微血管密度（MVD）：假手術(shù)組與正常組比較腦組織中微血管密度（MVD）無(wú)差異（P>0.05）；和血生終方組（HXSLF）與假手術(shù)組和正常組比較腦梗死組織中微血管密度（MVD）顯著升高（P<0.01）；和血生絡(luò)方組（HXSLF）與模型組比較腦梗死組織中微血管密度（MVD）顯著升高（P<0.01）。

5、
　　 結(jié)論：依據(jù)和血生絡(luò)法創(chuàng)立的和血生絡(luò)方可以有效改善動(dòng)物模型的一般狀況，有效保護(hù)損傷腦組織，提高生存質(zhì)量。和血生絡(luò)方可以降低動(dòng)物模型腦梗死面積，并且具有明顯的促進(jìn)腦梗死局部血管新生的作用。
　　 VEGF是一種重要的血管生成因子，特異性強(qiáng)有力刺激內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂，主要在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面有結(jié)合位點(diǎn)。缺血缺氧刺激可迅速誘導(dǎo)VEGF表達(dá)。和血生絡(luò)方可以上調(diào)血清VEGF表達(dá)強(qiáng)度，提示本方具有上調(diào)促血管新生因子的作用，從而促進(jìn)