CBN對(duì)腦缺血再灌注小鼠的保護(hù)作用.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文CBN對(duì)腦缺血再灌注小鼠的保護(hù)作用姓名：金文申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：生藥學(xué)指導(dǎo)教師：杜力軍2002.7.1頌士學(xué)位論文中義摘要中文摘要目前研究表明，急慢性缺血性腦損傷使局部微循環(huán)血流下降，氧和葡萄糖供應(yīng)下降，線粒體功能受損，導(dǎo)致能量代謝障礙，再灌注還可以造成自由基產(chǎn)生增加，對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣緩沖能力下降，最終導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞損傷、死亡。腦血管新藥金森腦泰粉針劑(Cerebralbloodnutrition，CBN)由葛根

2、黃酮(含量82％)和三七皂苷(含量94％)按6：4的比例組合而成，臨床用于治療缺血性腦梗塞。為了進(jìn)一步研究CBN的腦保護(hù)作用的機(jī)理，為臨床應(yīng)用提供有力的理論根據(jù)，本研究采用小鼠腦缺血再灌注模型，從體外實(shí)驗(yàn)、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)觀察了形態(tài)學(xué)、SOD活性、MDA含量、ATPase活性、單胺類(lèi)遞質(zhì)等方面CBN對(duì)腦的保護(hù)作用，為進(jìn)一步探討其對(duì)線粒體的保護(hù)作用，提取了小鼠的腦線粒體，觀察其對(duì)線粒體的影響。本研究采用生化、組化、細(xì)胞生物、分子生物等技術(shù)方法，從

3、整體、細(xì)胞、細(xì)胞器、分子水平等方面觀察了CBN對(duì)缺血再灌注腦的保護(hù)作用。本研究結(jié)果顯示，小鼠腦缺血再灌注損傷后，海馬CAl區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)目減少，腦組織SOD活性降低，MDA含量升高，CBN能增加海馬CAl區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)目，并保護(hù)腦內(nèi)SOD活性，減少M(fèi)DA的生成，提示CBN減少了氧自由基的產(chǎn)生，減輕脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，并且增強(qiáng)了機(jī)體清除自由基的能力，從而減輕自由基誘導(dǎo)的損害。腦缺皿再灌注后，能量代謝障礙、興奮性氨基酸大量釋放以及大量氧自由基的產(chǎn)生

4、均可使ATPase活性降低，從而導(dǎo)致一系列的病理生理過(guò)程改變。本研究表明，CBN可以減輕腦缺血再灌注后腦內(nèi)ATPase活性的降低，且呈劑量依賴性，減輕了腦缺血再灌注損傷。體外腦神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，CBN可以直接作用于腦神經(jīng)元，并對(duì)其起保護(hù)作用。神經(jīng)細(xì)胞缺糖缺氧后，LDH逸漏率明顯增高，MDA含量顯著升高，SOD活性下降，表明細(xì)胞膜損傷加重，細(xì)胞清除自由基的能力下降。CBN(104，104)均能顯著改善這些異常變化，并表現(xiàn)出明顯的劑

5、量依賴關(guān)系，其中在升高SOD活性方面，CBN(10“)藥效優(yōu)于三七皂苷(10。4)。由此提示，CBN對(duì)于腦血栓梗塞所引起的缺氧狀態(tài)的腦神經(jīng)元及其功能具有較好的保護(hù)作用。小鼠腦缺血再灌注損傷后，腦線粒體膜腫脹，表現(xiàn)為線粒體的OD520。。值降低，CBN(50，100mg／kg，iv)的OD520。。值顯著增加，即對(duì)腦線粒體膜腫脹有明顯的抑制作用，表明CBN對(duì)腦線粒體膜有一定的保護(hù)作用。根據(jù)線粒體的拉曼光譜和傅立葉轉(zhuǎn)換近紅外光譜掃描的結(jié)果，