和血生絡(luò)法對(duì)急性心肌梗死大鼠血管新生的干預(yù)作用.pdf

1、目的：通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，觀察和血生絡(luò)法對(duì)急性心肌梗死后大鼠梗死缺血區(qū)血管新生的干預(yù)情況及該法對(duì)缺血局部促血管新生因子VEGF蛋白表達(dá)的影響，初步探討和血生絡(luò)法是否具有促血管新生作用，并進(jìn)一步闡明其機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：本實(shí)驗(yàn)采用結(jié)扎96只Wistar雄性大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支的方法，建立急性心肌梗死動(dòng)物模型，造模成功后將動(dòng)物按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分組，分別為模型組(AMI)、消心痛組(ID)、麝香保心丸組(SXBX)、和

2、血生絡(luò)低劑量組(HXSL-L)、和血生絡(luò)高劑量組(HXSL-H)、假手術(shù)組(SHAM)6組。實(shí)驗(yàn)期間，大鼠自由飲水?dāng)z食，普通飼料專人喂養(yǎng)。于術(shù)后24h灌胃給藥，HXSL-L組灌服1倍等效劑量中藥(9.9g·kg-1·d-1)，HXSL-H組灌服兩倍等效劑量中藥(19.8g·kg-1·d-1)，ID組灌服一倍等效劑量藥物(2.7mg·kg-1·d-1)，SXBX組灌服一倍等效劑量藥物(2mg·kg-1·d-1)每天一次；AMI組和SHAM

3、組大鼠灌胃等量蒸餾水，連續(xù)用藥4W。給藥期間觀察大鼠的一般狀況，應(yīng)用彩色多普勒超聲儀檢測(cè)左室收縮功能。四周后，各組腹主動(dòng)脈取血并取心臟標(biāo)本備用。采用TTC染色法測(cè)定大鼠左室的心肌梗死范圍，應(yīng)用酶聯(lián)免疫(ELISA)方法進(jìn)行血清VEGF含量的檢測(cè)。采用免疫組化PV染色法，通過(guò)標(biāo)記缺血心肌局部第八因子(FVIII)測(cè)定缺血局部血管和微血管密度，分析VEGF的表達(dá)，并檢測(cè)各組心肌梗死范圍來(lái)觀察局部血管新生情況。 結(jié)果: 1.大

4、鼠一般狀況的比較：和血生絡(luò)方能顯著改善心肌梗死后大鼠的一般狀況；高劑量組可以明顯改善大鼠的活動(dòng)、皮毛光澤度、飲食等狀況。 2.彩色多普勒超聲：治療組(HXSL-L組、HXSL-H組)的左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF，％)高于AMI組，且差別均具有顯著意義(P＜0.01)。 3.血清VEGF含量：HXSL-H組動(dòng)物血清中的VEGF含量均遠(yuǎn)高于SXBX組及AMI組(P＜0.01)。 4 心肌梗死范圍：HXSL-L組心肌梗死

5、范圍小于AMI組(P＜0.05)，HXSL-H組心肌梗死范圍小于AMI組(P＜0.01)；HXSL-H組梗死范圍小于SXBX組(P＜0.05)； 5 心肌組織中血管數(shù)量和微血管密度(MVD)：治療組(HXSL-L，組、HXSL-H組)免疫組化切片中梗死邊緣區(qū)第八因子(FVIII)著色的微血管數(shù)量及密度高于AMI組(P＜0.01)，且HXSL-H組的MVD值高于SXBX組(P＜0.05)。 6 心肌梗死邊緣區(qū)VEGF蛋白表

6、達(dá)免疫組化檢測(cè)：HXSL-L組、HXSL-H組VEGF的表達(dá)均高于AMI組(P＜0.01)。 結(jié)論：依和血生絡(luò)法所創(chuàng)立的和血生絡(luò)方可以有效改善動(dòng)物模型的一般狀況，改善動(dòng)物模型的心臟收縮功能，提高生存質(zhì)量。和血生絡(luò)方可以顯著降低動(dòng)物模型心肌梗死面積，并且具有促進(jìn)心肌梗死局部血管新生的傾向。 VEGF是一種重要血管生成因子，特異性強(qiáng)有力刺激內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂，主要在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面有結(jié)合位點(diǎn)。缺氧刺激可迅速誘導(dǎo)VEGF表達(dá)。和