十字花科黑腐病菌Ⅲ型效應(yīng)蛋白XC3176和XC1210調(diào)控植物先天免疫的研究.pdf

1、寄主植物在遭受植物病原菌的侵染時，能識別到病原菌所攜帶的病原物相關(guān)分子模式(pathogen-associated molecular patterns，PAMPs)從而激活病原物相關(guān)分子模式免疫反應(yīng)(PAMP-triggeredimmunity,PTI)。植物病原細(xì)菌通過Ⅲ型分泌系統(tǒng)將效應(yīng)蛋白注入植物細(xì)胞，抑制植物的PTI，引起植物效應(yīng)物激發(fā)的敏感性(effector-triggeredsusceptibility,ETS)。目前大多

2、數(shù)效應(yīng)蛋白與植物之間的相互作用分子機(jī)制仍然不清楚，研究效應(yīng)蛋白與植物之間的相互作用將加深我們對細(xì)菌致病機(jī)理和植物免疫應(yīng)答的認(rèn)識。
　　十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris，Xcc)是一種重要的植物病原細(xì)菌，能夠在全球范圍內(nèi)侵染十字花科植株，帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前在Xcc8004中已鑒定了17個Ⅲ型效應(yīng)蛋白，但大部分效應(yīng)蛋白與植物之間相互作用的分子機(jī)制仍不清楚。本實驗擬對XC3

3、176和XC1210這兩個致病相關(guān)Ⅲ型效應(yīng)蛋白調(diào)控植物的先天免疫進(jìn)行研究。
　　首先通過PEG/Ca介導(dǎo)擬南芥原生質(zhì)體瞬時表達(dá)系統(tǒng)，對XC3176和XC1210進(jìn)行亞細(xì)胞定位，發(fā)現(xiàn)XC3176定位在寄主細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，XC1210定位在寄主細(xì)胞的細(xì)胞膜上。然后檢測了XC3176和XC1210的缺失突變體在擬南芥上的致病力，相比于野生型Xcc8004， XC3176和XC1210的缺失突變體在擬南芥上的致病力明顯下降。為了進(jìn)一步探究

4、XC3176和XC1210與寄主植物之間的相互作用，本研究構(gòu)建了在擬南芥中穩(wěn)定表達(dá)XC3176和XC1210的轉(zhuǎn)基因植系。實驗發(fā)現(xiàn)XC3176和XC1210的穩(wěn)定表達(dá)能夠抑制寄主植物的胼胝質(zhì)沉積，降低寄主植物PTI早期防御相關(guān)基因At1g51890、At2g17740、AtFRK1和At5g57220的表達(dá)。通過壓滲接種的方法檢測Xcc8004、丁香假單胞菌DC3000和△hrcV在XC3176、XC1210以及它們的對照空載體pBI1