無創(chuàng)性延遲肢體缺血預適應對大鼠心肌缺血再灌注損傷保護作用的研究.pdf

1、目的：研究無創(chuàng)性延遲肢體缺血預適應(NDLIP)對大鼠心肌缺血再灌注(I/R)損傷的保護作用，并探討線粒體ATP敏感性鉀通道(mitoKATP)在NDLIP延遲保護效應中的作用。 方法：健康雄性Wistar大鼠隨機分為5組。(1)I/R組(n=22)；心臟冠狀動脈左前降支(LAD)實施30min缺血/120min再灌注。(2)早期心肌缺血預適應組(EMIP組，n=22)：心臟LAD先行3次5min缺血/5min再灌注，隨后實施3

2、0min缺血/120min再灌注。(3)NDLIP組(n=22)：左后肢實施3次5min缺血/5min再灌注，每天1次，連續(xù)3天，第4天對心臟LAD實施30min缺血/120min再灌注。(4)I/R+mitoKATP特異性阻斷劑5-羥基癸酸鈉(5-HD)組(I/R+5-HD組，n=22)：I/R組大鼠LAD結扎前靜脈注射5-HD(9mg/kg)，LAD結扎25min開始至再灌注120min末持續(xù)靜脈輸入5-HD(1mg/kg)。(5)

3、NDLIP+5-HD組(n=22)：NDLIP組大鼠LAD結扎前靜脈注射5-HD(9mg/kg)，LAD結扎25min開始至再灌注120min末持續(xù)靜脈輸入5-HD(1mg/kg)。從ECG、心肌細胞死亡、心肌抗氧化能力、血管內(nèi)皮功能以及凝血功能變化等方面評價NDLIP延遲心臟保護作用。監(jiān)測LAD30min缺血/120min再灌注期間心率(HR)、平均動脈壓(MAP)、ECG變化；TTC染色法測定心肌梗死面積，TUNEL法檢測心肌細胞凋

4、亡，免疫組化法檢測凋亡相關蛋白Fas、FasL表達情況，HE染色觀察心肌形態(tài)學改變；比色法測定心肌組織髓過氧化物酶(MPO)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、錳.超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、黃嘌呤氧化酶(XOD)活力，丙二醛(MDA)含量，以及血清一氧化氮(NO)濃度；RT-PCR法檢測心肌Mn-SODmRNA含量，ELISA法檢測血清內(nèi)皮素-1(ET-1)含量；凝固法測定凝血酶原時間(PT)、活

5、化部分凝血活酶時間(APTT)和纖維蛋白原(FIB)含量。 結論： 1.NDLIP明顯降低I/R所致ST-段抬高幅度，推遲缺血期VPC、VT出現(xiàn)時間，縮短其持續(xù)時間，降低惡性室性心律失常發(fā)生率，具有延遲抗心律失常作用，其保護作用強度與EMIP相當。NDLIP對I/R所致MAP和HR變化無影響。 2.NDLIP能縮小I/R所致心肌梗死面積，減少心肌細胞凋亡，改善心肌形態(tài)學改變，其抗細胞死亡的延遲保護作用強度與EMl

6、P相當。機制可能與降低MPO活力，下調凋亡相關蛋白Fas、FasL表達有關。 3.NDLIP能增強I/R損傷心肌的抗氧化能力，減輕過氧化損傷，此作用強度與EMIP相當。 4.NDLIP能增加基礎狀態(tài)下的血清NO濃度，使ET-1與No之間的平衡向NO移動。I/R后，NDLIP減輕血管內(nèi)皮功能障礙，保留血清NO濃度，降低ET-1升高幅度，使ET-1與NO之間的平衡接近正常，其保護作用強度與EMIP相當。 5.NDLI