毛囊細胞與組織工程皮膚的構(gòu)建.pdf

1、近年來，隨著組織工程技術(shù)的迅速發(fā)展，組織工程皮膚已開始在臨床上廣泛使用。然而目前的組織工程皮膚的種子細胞來源主要是皮膚真皮成纖維細胞和表皮細胞，由此構(gòu)建的組織工程皮膚具有和正常皮膚相似的真皮和表皮雙層結(jié)構(gòu)但沒有毛囊、皮脂腺等皮膚附屬器官，在組織結(jié)構(gòu)上與正常皮膚組織仍有較大差異。 毛囊細胞在皮膚創(chuàng)傷修復中具有重要作用，可以作為種子細胞來源參與皮膚創(chuàng)傷后修復，而目前國內(nèi)外利用毛囊細胞構(gòu)建組織工程皮膚的文獻報道較少。本研究在分離培養(yǎng)毛

2、囊外根鞘細胞、毛乳頭細胞、真皮成纖維細胞以及表皮細胞的基礎(chǔ)上，對毛乳頭細胞進行體外誘導，以證明其干細胞特性，為其作為毛囊化組織工程皮膚種子細胞提供依據(jù)；利用組織工程技術(shù)，以毛乳頭細胞作為真皮細胞，以外根鞘細胞和表皮細胞成功制備組織工程皮膚；同時，將毛乳頭細胞和外根鞘細胞重組并在腎被膜下培養(yǎng)，試圖尋找新的制備含毛囊結(jié)構(gòu)組織工程皮膚的方法。具體實驗如下： 1、以簡便快捷的培養(yǎng)方法獲得大量生長狀態(tài)良好的毛囊外根鞘細胞和毛乳頭細胞：以新

3、生SD大鼠為細胞來源，應(yīng)用機械法拔取完整生長初期毛囊，組織塊法培養(yǎng)毛乳頭細胞和外根鞘細胞。 2、利用常規(guī)的體外誘導方法對毛乳頭細胞進行體外誘導，分別得到類成骨細胞和類脂質(zhì)細胞。 3、用實驗室設(shè)計的組織工程皮膚培養(yǎng)系統(tǒng)，分別用毛乳頭細胞和外根鞘細胞，毛乳頭細胞和表皮細胞構(gòu)建組織工程皮膚，結(jié)果均構(gòu)建出含真皮和表皮的組織工程皮膚，表明毛乳頭細胞可作為組織工程皮膚的種子細胞。 4、將毛乳頭細胞與外根鞘細胞重組離心，并將離

4、心所得細胞團放入SD大鼠的腎被膜下培養(yǎng)。兩周后取出，經(jīng)髓染色觀察毛囊形成情況。結(jié)果移植物中有多個毛囊樣結(jié)構(gòu)出現(xiàn)。 本實驗成功構(gòu)建了以毛乳頭細胞為真皮細胞、以表皮細胞和外根鞘細胞為表皮細胞的組織工程雙層皮膚，并證明了毛乳頭細胞的干細胞特性。結(jié)果表明毛囊細胞作為種子細胞，不但增加了組織工程皮膚種子細胞的來源范圍，也為構(gòu)建含毛囊結(jié)構(gòu)的組織工程皮膚提供新的思路與方法，為組織工程皮膚的進一步完善奠定了新的理論基礎(chǔ)，也為皮膚缺損的修復提供了