氣腫疽梭菌單克隆抗體的制備及鑒定.pdf

1、氣腫疽(Clostridium chauvoei)又稱黑腿病，是由氣腫疽梭菌引起的反芻動(dòng)物的急性、發(fā)熱性傳染病。該病主要呈散發(fā)或地方性流行，廣泛分布于自然界。在一定條件下，可引起機(jī)體嚴(yán)重的疾病，給畜牧養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。而針對(duì)該病的快速檢測(cè)技術(shù)卻很少。迅速、準(zhǔn)確地診斷疾病是防治該菌感染的關(guān)鍵。因此，本實(shí)驗(yàn)利用滅活的標(biāo)準(zhǔn)氣腫疽梭菌C54-1為抗原免疫6-8周齡的雌性BALB/c小鼠，采用傳統(tǒng)的雜交瘤技術(shù)，經(jīng)間接ELISA和有限稀釋法

2、篩選和克隆后，獲得了一株能穩(wěn)定分泌氣腫疽梭菌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞系，并命名為3B7。對(duì)制備的1株（3B7）雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行間接ELISA法及Western blotting特異性鑒定，用單抗隆抗體亞類鑒定試劑盒鑒定其MAb亞型，用常規(guī)方法進(jìn)行染色體分析和腹水抗體的效價(jià)測(cè)定。特異性試驗(yàn)結(jié)果顯示，MAb只與氣腫疽梭菌發(fā)生反應(yīng)，與腐敗梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌（A、B、C、D、E型）、大腸桿菌O:157、沙門氏菌045-2(D群)、布魯氏菌M5-90