注射用載雌二醇m PEG-PLA緩釋微球的制備及體內外釋放研究.pdf

1、本課題以聚乙二醇單甲醚-聚D,L-乳酸嵌段共聚物[mPEG-PLA]為載體材料,采用O/W乳化溶劑揮發(fā)法研究制備了注射用可生物降解載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球。用于肌肉或皮下注射給藥,在體內隨著共聚物的水解作用,包埋于微球中的藥物經(jīng)擴散作用釋放出來,達到緩釋長效的目的。該制劑給藥方便,一次注射能夠維持一個月以上的藥效,可安全、有效地防治因雌激素匱乏導致的更年期綜合征。研究內容主要包括注射用載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球的制備、微球

2、的體外釋藥機理研究以及體內藥動學研究。
　　 1、注射用載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球的制備研究
　　 本研究考察了乳化劑對O/W乳狀液的穩(wěn)定作用,發(fā)現(xiàn)了適合于mPEG-PLAO/W乳狀液的穩(wěn)定性較好的乳化劑。
　　 采用O/W乳化溶劑揮發(fā)法制備了雌二醇微球。選用中心組合設計及效應曲面法對多因素多指標制備工藝進行綜合優(yōu)化篩選,得到較佳制備工藝。建立了對多因素多指標實驗設計及分析的綜合優(yōu)化篩選方法。結果表明所制得

3、的微球表面光滑圓整,粒徑分布均勻,平均粒徑為34.02±15.44μm。,跨距為1.02,包封率大于80％。
　　 建立了高效液相色譜法測定載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球的含量,雌二醇在5～100μg·mL-1濃度范圍內,峰面積對濃度響應值呈現(xiàn)良好的線性關系。日內精密度RSD≤0.49％,日間精密度RSD≤2.07％,回收率為98.85％。結果表明本方法操作簡便、快速、準確,適用于mPEG-PLA嵌段共聚物微球中雌二醇的含量測

4、定。
　　 2、載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球體外釋放研究
　　 本研究模擬生理環(huán)境,分別采用兩種釋放介質,搖床法對優(yōu)化工藝制備的微球進行體外釋放度評價測定。通過微球干燥失重實驗、顯微鏡觀察微球的降解過程及對mPEG-PLAMw8982,Mw13602,Mw24766三種不同分子量制備的載雌二醇緩釋微球進行體外釋放度測定,探索微球的降解過程與控制藥物釋放過程的關系,并進行微球體外釋放動力學研究。結果表明在pH7.4PB

5、S加入增溶劑的釋放介質中微球表現(xiàn)出較好的釋藥行為,mPEG-PLA(Mw13602)載雌二醇緩釋微球第一天釋放量6.56％,30天累積釋放量85.81％,其釋藥行為符合一級動力學過程。
　　 同時,對載雌二醇mPEG-PLA(Mw13602)緩釋微球建立了體外加速釋藥方法以縮短評價周期,對長期試驗和加速試驗的釋放度數(shù)據(jù)進行相關性擬合。結果表明介質的溫度越高釋放速率越快,釋放速率與溫度呈正相關性。對于mPEG-PLA(Mw1360

6、2)載雌二醇緩釋微球,介質溫度在55℃時,其加速釋放過程與長期釋放過程具有良好的相關性(R2=0.9971).可通過加速實驗的方法預測長期實驗的微球釋放度。
　　 3、載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球動物體內藥動學研究
　　 依據(jù)微球體外釋放度,選擇釋放特性符合設計要求的微球,以beagle犬為實驗動物,對載雌二醇mPEG-PLA緩釋微球的體內過程進行了初步研究。beagle犬肌注微球給藥后,采用放射免疫法測定血藥濃度,

7、統(tǒng)計矩法計算藥動學參數(shù),結果表明該緩釋微球可有效控制藥物在體內的釋放,能夠維持約2周較平穩(wěn)的血藥濃度,藥動學參數(shù):AUC,AUMC,MRT分別為285.042(pg·d/mL);2197.96(pg·d2/mL);7.711(d)。體內外釋放相關性分析結果為:對應時間點的體外累積百分釋放量與體內藥動學參數(shù)AUC顯著相關(R2=0.9930)?？梢酝ㄟ^體外累積百分釋放量預測體內對應時間點的AUC值,推測體內藥動學過程的相關情況。