蠶繭層多肽的制備及其抗氧化活性研究.pdf

1、抗氧化肽（antioxidant peptide）作為一種生物活性肽（bioactive peptides），不僅可用于食品的天然抗氧化劑，還可作為功能因子應(yīng)用于化妝品中。利用農(nóng)產(chǎn)品加工的副產(chǎn)物制備抗氧化肽，提高生物資源的利用率，已成為活性肽開發(fā)與研究的熱點。 我國是個蠶業(yè)大國，每年產(chǎn)生大量的蠶繭副產(chǎn)品。蠶繭層蛋白是一種優(yōu)質(zhì)的純天然全價蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)含量高達96％以上。論文以干蠶繭層為原料，利用蛋白酶水解制備蠶繭層多肽，采用超濾

2、技術(shù)進行分離純化，并研究了蠶繭層多肽的抗氧化性。主要研究結(jié)果如下： 1．研究了pH值、時間等因素對鐵離子還原/抗氧化力（FRAP）分析法的影響。結(jié)果表明，F(xiàn)RAP法的最佳工作條件為pH3．4的醋酸緩沖體系，反應(yīng)時間10min。 2．確定了原料的變性預(yù)處理方法，選擇出最適蛋白水解酶。變性預(yù)處理條件為100℃水浴加熱2h。五種蛋白酶分別作用于蠶繭層蛋白，測定酶解液的總抗氧化力，篩選出Multifect Neutral細菌中性

3、蛋白酶作為試驗用酶。 3．采用單因素試驗和正交試驗相結(jié)合，優(yōu)化中性酶最優(yōu)工藝條件為：溫度60℃、pH6．5、加酶量10％（w/w）、底物濃度3．3g/100mL、酶解時間210min，其水解液的水解度為4．2％，固形物含量9．2mg/mL，稀釋5倍后在595nm的吸光值為1．795，表明該多肽水解液具有較強的抗氧化能力。 4．對不同分子量多肽濾液的抗氧化能力進行了測定。采用超濾技術(shù)分別獲得分子量3kDa以下至10kDa以

4、上的4種多肽濾液，并以FRAP法分析了蠶繭層酶解原液及其多肽濾液的總抗氧化能力，A595分別為1．810、0．593、1．605、0．783、1．423。結(jié)果表明，分子量低于3kDa的多肽濾液抗氧化能力最強。 將分子量低于3kDa的蠶繭層多肽濾液冷凍干燥，并與化學(xué)合成抗氧化劑BHT和Vc的抗氧化能力進行了比較，三者濃度均為1．5mg/mL時，A595分別為1．773、2．618、2．206，即1．5g蠶繭層抗氧化肽凍干制品相當(dāng)于