HSF1在嚴(yán)重?zé)齻装Y反應(yīng)中調(diào)控HMGB1和IL-10表達(dá)分子機(jī)制的研究.pdf

1、熱休克因子1(heat shock factor1，HSF1)是最早被發(fā)現(xiàn)的熱休克轉(zhuǎn)錄因子。在各種應(yīng)激反應(yīng)，特別是熱休克反應(yīng)時(shí)調(diào)控HSPs(heat shockproteins，HSPs)的誘導(dǎo)表達(dá)中發(fā)揮重要作用。 目的：本研究以RAW264.7細(xì)胞系為研究對(duì)象，以燒傷血清刺激建立燒傷細(xì)胞模型，在體外研究HSF1與HMGB1(high mobility groupbox)和IL-10(Interleukin-10)啟動(dòng)子區(qū)HSE

2、(heat shock element)相互作用產(chǎn)生的抗炎癥機(jī)制。 方法：Western blot法檢測(cè)燒傷血清刺激后的RAW264.7細(xì)胞與正常對(duì)照組中HSF1與NF-κB表達(dá)量，應(yīng)用凝膠阻滯(EMSA)法檢測(cè)HSF1與炎癥因子HMGB1和抗炎癥因子IL-10啟動(dòng)子區(qū)相互作用，同時(shí)探索NF-κB是否參與上述HSF1-HSE的相互作用。 結(jié)果： (1)發(fā)現(xiàn)正常培養(yǎng)條件下的RAW264.7細(xì)胞幾乎不表達(dá)HSF1少量

3、表達(dá)NF-κB，而加入燒傷血清刺激后的細(xì)胞能夠明顯穩(wěn)定表達(dá)HSF1同時(shí)大量表達(dá)NF-kB； (2)結(jié)果顯示HSF1與HMGB1和IL-10的啟動(dòng)子區(qū)HSE有相互作用； (3)凝膠超阻滯法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)NF-κB并不參HSF1與HMGB1和IL-10啟動(dòng)子區(qū)HSE的結(jié)合。 結(jié)論： (1)燒傷血清刺激細(xì)胞后可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生自身保護(hù)反應(yīng)，大量表達(dá)HSF1蛋白，通過(guò)一系列細(xì)胞信號(hào)通路抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生，也證明體外燒傷模型