BDA示蹤觀察胸腰段脊髓損傷大鼠膀胱神經(jīng)傳導(dǎo)通路的改變.pdf

1、目的：
　　 1.觀察胸腰段脊髓損傷不同外力方向(腹側(cè)或背側(cè))下，脊髓損傷大鼠神經(jīng)通路改變的差異，以及是否與膀胱功能改變相關(guān)。
　　 2.了解神經(jīng)通路改變?cè)谏窠?jīng)源性膀胱發(fā)病機(jī)制中的作用和意義。
　　 方法：采用清潔級(jí)雌性SD大鼠58只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(<6只)和脊髓損傷6個(gè)小組(每組6-8只)，使用標(biāo)準(zhǔn)化脊髓損傷動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)裝置制備動(dòng)物模型，損傷部位選擇在T12-L1水平，對(duì)照組大鼠僅咬除脊突和椎板，不損傷脊

2、髓。術(shù)后第1天，所有大鼠開(kāi)腹，注射BDA于膀胱壁。采用改良的Tarlov分級(jí)評(píng)分、Ashworth肌張力評(píng)分、斜板實(shí)驗(yàn)及BBB評(píng)分評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)功能。術(shù)后14天評(píng)測(cè)膀胱功能。BDA注射2周后取出脊髓組織，行BDA染色成像。所得數(shù)據(jù)根據(jù)方差齊性檢驗(yàn)結(jié)果，選擇應(yīng)用雙因素方差分析或秩和檢驗(yàn)分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　 結(jié)果：
　　 1.脊髓損傷組大鼠改良的Tarlov分級(jí)評(píng)分、斜板實(shí)驗(yàn)及BBB評(píng)分均明顯低于對(duì)照組，Ashwo

3、rth肌張力評(píng)分、高于對(duì)照組(p<0. 05)。
　　 2.增加打擊高度，背側(cè)損傷組大鼠脊髓受到打擊沖量增加，雙下肢改良的Tarlov分級(jí)評(píng)分逐漸下降，Ashworth肌張力評(píng)分增高、大鼠斜板實(shí)驗(yàn)臨界角逐漸下降，BBB評(píng)分呈降低趨勢(shì)。
　　 3.隨著砝碼質(zhì)量的增加，腹側(cè)損傷組大鼠受到的向上提拉的力量增大，造模大鼠雙下肢改良的Tarlov分級(jí)評(píng)分法評(píng)分逐漸下降，大鼠斜板實(shí)驗(yàn)臨界角逐漸下降，BBB評(píng)分呈降低趨勢(shì)，但是Ashw

4、orth肌張力評(píng)分只有左下肢見(jiàn)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 4.尿流動(dòng)力學(xué)檢查結(jié)果顯示與對(duì)照組相比背側(cè)脊髓損傷大鼠膀胱最大容量和順應(yīng)性比較有顯著性差異(P<0. 05)，中重?fù)p傷組((4厘米和10厘米)之間無(wú)明顯差異，但與輕損傷組有明顯增加，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與對(duì)照組相比腹側(cè)損傷大鼠膀胱最大容量比較有顯著性差異((P<0. 05);但順應(yīng)性無(wú)明顯差異性;而且損傷組各組之間膀胱最大容量并無(wú)明顯差異。
　　 5.BDA神經(jīng)示蹤后，

5、經(jīng)過(guò)免疫組化顯色后，BDA陽(yáng)性的神經(jīng)元呈棕褐色深染。觀察顯示，陽(yáng)性的神經(jīng)元在脊髓損傷平面以上及以下均存在。陽(yáng)性的神經(jīng)元在脊髓內(nèi)分布呈現(xiàn)一定規(guī)律，我們發(fā)現(xiàn)膀胱神經(jīng)傳導(dǎo)在脊髓導(dǎo)水管前方交叉向上傳導(dǎo)。并且在脊髓損傷組中，損傷部位以上出現(xiàn)一側(cè)深染者，在走行過(guò)程中可以看到BDA染色陽(yáng)性的區(qū)域在脊髓導(dǎo)水管向?qū)?cè)擴(kuò)散的表現(xiàn)。損傷平面以上脊髓階段切片顯示脊髓損傷組較對(duì)照組陽(yáng)性神經(jīng)元明顯減少，輕損傷組（2cm組）較中損傷組（4cm組）明顯減少。與對(duì)照組相

6、比脊髓損傷大鼠T10平面IOD比較明顯降低，有顯著性差異。4厘米和10厘米組較2厘米組打擊針造成的背側(cè)脊髓損傷大鼠T10平面IOD發(fā)生顯著性減低(P＜0.05)。腹側(cè)損傷組大鼠T10平面IOD有差異，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1.脊髓所受打擊損傷沖量的進(jìn)行性增大與神經(jīng)元的減少成正比關(guān)系，說(shuō)明在大鼠的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭屑顾璞硞?cè)損傷臨床結(jié)局轉(zhuǎn)歸與脊髓所受沖量有關(guān)。脊髓運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)通路上這些陽(yáng)性神經(jīng)元的減少，是脊髓運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)功能