大鼠脊髓損傷致神經(jīng)源性膀胱不同時(shí)期膀胱順應(yīng)性改變與形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　建立較為穩(wěn)定的脊髓橫斷致神經(jīng)源性膀胱大鼠模型，通過測量計(jì)算大鼠脊髓橫斷后6周及12周尿動力學(xué)指標(biāo)，包括膀胱最大容量、逼尿肌漏尿點(diǎn)壓及膀胱順應(yīng)性，觀察大鼠膀胱重量的變化及進(jìn)一步形態(tài)學(xué)分析各組膀胱壁內(nèi)結(jié)構(gòu)以及膀胱Cajal樣間質(zhì)細(xì)胞(Cajal-like interstitial cells,ICC-LC)數(shù)量的變化，探討損傷后不同時(shí)期膀胱順應(yīng)性的病生理改變。試圖發(fā)現(xiàn)大鼠膀胱壁組織結(jié)構(gòu)及ICC-LC數(shù)量變化在脊髓損傷致神經(jīng)

2、源性膀胱發(fā)病中的作用，為明確脊髓損傷所致神經(jīng)源性膀胱尤其是低順應(yīng)性膀胱的發(fā)病機(jī)制提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)使用體重為190~210g的雌性Wistar大鼠72只，隨機(jī)分為四組：A組為假手術(shù)對照6周組（12只），B組為胸10節(jié)段脊髓橫斷6周組（24只），C組為假手術(shù)對照12周組（12只），D組為胸10節(jié)段脊髓橫斷12周組（24只）。兩脊髓橫斷組（B組、D組）行大鼠脊髓 T10水平完全橫斷，常規(guī)稱重、麻醉后，大鼠

3、俯臥位固定于鼠板，骨性標(biāo)志定位T10節(jié)段脊髓，充分暴露胸椎棘突，咬骨鉗破壞椎體顯露脊髓5mm，眼科手術(shù)刀迅速完整離斷脊髓。兩對照組只暴露T10脊髓后便縫合切口。A、B組于手術(shù)后6周行尿動力學(xué)檢測，C、D組于手術(shù)后12周行尿動力學(xué)檢測。處死各組大鼠后膀胱取材并稱重。行HE染色、Verhoeff-Van Gieson染色，分別觀察膀胱壁平滑肌及纖維結(jié)締組織（包括膠原纖維及彈性纖維）面積百分比的變化量；應(yīng)用免疫熒光標(biāo)記膀胱壁ICC-LC的分布

4、。每一標(biāo)本隨機(jī)選定5處視野留照，并用Image pro6圖像處理軟件分析，最后統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果：
　　1.我們成功建立穩(wěn)定的T10節(jié)段脊髓橫斷大鼠神經(jīng)源性膀胱模型，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供基礎(chǔ)。
　　2.術(shù)后6周時(shí)，B組24只大鼠，死亡7只，存活17只；A組全部存活。12周時(shí)，D組24只大鼠，死亡6只，另有1只尿路感染伴發(fā)膀胱結(jié)石，亦不計(jì)入統(tǒng)計(jì)；C組全部存活。各組尿動力結(jié)果顯示：B組膀胱順應(yīng)性較對照組明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

5、P＜0.05）；D組順應(yīng)性較對照組降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；D組（12周）順應(yīng)性明顯低于B組（6周），有顯著差異（P<0.01）。
　　3．大鼠脊髓橫斷6周及12周大鼠膀胱的結(jié)構(gòu)發(fā)生了顯著改變，與同時(shí)間點(diǎn)對照組相比，膀胱重量均增加，且有顯著差異（P＜0.01)；兩實(shí)驗(yàn)組膀胱/體重比均高于各自同期對照組，有顯著差異(P＜0.01）。
　　在光鏡下，脊髓橫斷實(shí)驗(yàn)組尤其是12周組，逼尿肌肥大且排列紊亂，肌束間膠原纖維明顯

6、增加。12周實(shí)驗(yàn)組纖維結(jié)締組織的百分含量大于6周實(shí)驗(yàn)組及對照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；6周實(shí)驗(yàn)組纖維結(jié)締組織百分含量也大于對照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。12周實(shí)驗(yàn)組與6周實(shí)驗(yàn)組相比，膠原纖維比例增加（P＜0.01）但彈性纖維比例未見明顯差異（P>0.05）。熒光顯微鏡下觀察，12周實(shí)驗(yàn)組每個(gè)視野下平均ICC-LC數(shù)量較對照組明顯增加（P<0.01）；6周實(shí)驗(yàn)組每視野下平均ICC-LC數(shù)量較對照組減少（P<0.05），有統(tǒng)

7、計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：
　　1大鼠T10節(jié)段脊髓損傷可致膀胱順應(yīng)性改變，即隨著損傷時(shí)間延長，膀胱順應(yīng)性顯示出先增高再降低的趨勢。
　　2大鼠脊髓損傷致神經(jīng)源性膀胱，隨著損傷時(shí)間延長，尿動力學(xué)結(jié)果顯示：6周膀胱的最大容量增加、膀胱漏尿點(diǎn)壓力增加不明顯、順應(yīng)性增加；12周膀胱最大容量有所較少但仍大于對照組、逼尿肌漏尿點(diǎn)壓力顯著增加、順應(yīng)性降低。
　　3脊髓損傷致神經(jīng)源性膀胱，大鼠膀胱壁的組織學(xué)發(fā)生改變，包括肌纖維走行