磁性骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向治療大鼠脊髓損傷模型的活體示蹤.pdf

1、目的:設(shè)計(jì)一種新型的磁性靶向投遞系統(tǒng)，將SPIO標(biāo)記BMSCs，通過(guò)蛛網(wǎng)膜下腔移植，并在脊髓損傷區(qū)水平外置一小型磁鐵，提高BMSCs靶向脊髓損傷區(qū)的遷移率，同時(shí)利用MR分子成像技術(shù)來(lái)示蹤磁標(biāo)干細(xì)胞的遷徙、分布及歸巢情況，為BMSCs移植治療脊髓損傷提供了一種新的思路和手段。
　　 方法:分離培養(yǎng)SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，用SPIO標(biāo)記BMSCs并檢測(cè)其生物學(xué)特性;體外磁鐵實(shí)驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)記細(xì)胞的磁靶向性，通電螺旋線圈測(cè)定實(shí)驗(yàn)所需的最小

2、磁場(chǎng)強(qiáng)度并選擇實(shí)驗(yàn)所需的磁鐵形狀;建立脊髓損傷模型，制作組織形態(tài)學(xué)標(biāo)本進(jìn)行HE染色觀察脊髓損傷情況，蛛網(wǎng)膜下腔移植磁標(biāo)干細(xì)胞并在脊髓損傷水平外置磁鐵，磁共振分子成像觀察磁標(biāo)干細(xì)胞的歸巢情況，組織切片普魯士藍(lán)染色檢測(cè)達(dá)到靶點(diǎn)的磁標(biāo)干細(xì)胞。
　　 結(jié)果:SPI(0)標(biāo)記SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞效率高，標(biāo)記率幾乎達(dá)100％，臺(tái)盼藍(lán)染色顯示磁標(biāo)干細(xì)胞組的活力與未標(biāo)記干細(xì)胞組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，CCK-8法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)磁標(biāo)干

3、細(xì)胞組的增殖活力與未標(biāo)記干細(xì)胞組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。體外磁鐵實(shí)驗(yàn)證明磁標(biāo)細(xì)胞具有特異的磁靶向性，通電螺旋線圈測(cè)定的實(shí)驗(yàn)所需最小磁場(chǎng)強(qiáng)度為0.0720T(720GS)，階梯狀磁鐵可使靶區(qū)磁標(biāo)干細(xì)胞分布均勻，有利于脊髓損傷的修復(fù)。HE染色顯示脊髓損傷區(qū)可見(jiàn)大量空洞及紅細(xì)胞，未損傷區(qū)未見(jiàn)明顯空洞形成。磁共振成像顯示細(xì)胞移植后1-4周磁鐵組T2*WI脊髓內(nèi)均可見(jiàn)明顯低信號(hào)影，非磁鐵組3周后T2*WI脊髓內(nèi)出現(xiàn)點(diǎn)狀低信號(hào)影，而對(duì)

4、照組1-4周T2*WI脊髓內(nèi)均未見(jiàn)低信號(hào)影。運(yùn)動(dòng)功能BBB評(píng)分顯示磁鐵組大鼠的功能恢復(fù)明顯高于非磁體組及對(duì)照組。普魯士藍(lán)染色示磁鐵組細(xì)胞移植后1-4周均可見(jiàn)大量藍(lán)染細(xì)胞，胞漿藍(lán)染、核紅染，非磁鐵組2周后可見(jiàn)少量藍(lán)染細(xì)胞，對(duì)照組1-4周均未見(jiàn)藍(lán)染細(xì)胞。
　　 結(jié)論:在外加磁場(chǎng)的作用下，SPIO標(biāo)記的BMSCs能準(zhǔn)確靶向投遞到脊髓損傷區(qū)，增強(qiáng)了BMSCs靶向遷徙的特異性，提高BMSCs靶向歸巢的遷移率及脊髓損傷區(qū)細(xì)胞數(shù)量;利用臨床高